|
تفاصيل المنتج:
|
| غاية: | للاستخدام البحثي فقط | تخزين: | 2-8 ℃ |
|---|---|---|---|
| تخصيص: | 48wells / 96wells | طريقة: | ساندويتش |
| Cat. قط. No. رقم.: | في Mo1153 | السيرة الذاتية(٪): | SD / يعني X100 |
| إبراز: | E Cadherin Elisa Kit,Mouse E Cad Elisa Kit,Research E Cadherin Elisa Kit |
||
Mouse E-Cadherin ، مجموعة E-Cad ELISA
تستخدم مجموعة ELISA هذه Sandwich-ELISA كطريقة.تم طلاء صفيحة Microelisa المتوفرة في هذه المجموعة مسبقًا بجسم مضاد خاص بـ E-Cad.يتم إضافة المعايير أو العينات إلى آبار Microelisa المجردة المناسبة ويتم دمجها مع الجسم المضاد المحدد.ثم يتم إضافة بيروكسيديز الفجل (HRP) - جسم مضاد مترافق خاص بـ E-Cad إلى كل بئر يتم تجريده من Microelisa ويتم تحضينه.يتم غسل المكونات المجانية.يضاف محلول الركيزة TMB إلى كل بئر.فقط تلك الآبار التي تحتوي على الجسم المضاد E-Cad و HRP المقترن بـ E-Cad ستظهر باللون الأزرق ثم تتحول إلى اللون الأصفر بعد إضافة محلول الإيقاف.تُقاس الكثافة الضوئية (OD) بالطيف الضوئي بطول موجة 450 نانومتر.تتناسب قيمة OD مع تركيز E-Cad.يمكنك حساب تركيز E-Cad في العينات بمقارنة OD للعينات بالمنحنى القياسي.
المواد المتوفرة مع المجموعة
| المواد المتوفرة مع المجموعة | 48 قرارات | 96 قرارات | تخزين | |
| 1 | دليل الاستخدام | 1 | 1 | RT |
| 2 | غشاء لوحة الإغلاق | 2 | 2 | RT |
| 3 | أكياس مختومة | 1 | 1 | RT |
| 4 | تعرية Microelisa | 1 | 1 | 2-8 ℃ |
| 5 | قياسي: 108 جالون / مل | 0.5 مل × 1 زجاجة | 0.5 مل × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
| 6 | مخفف قياسي | 1.5 مل × 1 زجاجة | 1.5 مل × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
| 7 | كاشف HRP- المتقارن | 3 مل × 1 زجاجة | 6 مل × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
| 8 | عينة مخفف | 3 مل × 1 زجاجة | 6 مل × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
| 9 | محلول الكروموجين أ | 3 مل × 1 زجاجة | 6 مل × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
| 10 | محلول الكروموجين ب | 3 مل × 1 زجاجة | 6 مل × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
| 11 | وقف الحل | 3 مل × 1 زجاجة | 6 مل × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
| 12 | غسل الحل | 20 مل (20X) × 1 زجاجة | 20 مل (30X) × 1 زجاجة | 2-8 ℃ |
إجراء
تمييع المعايير
1. تم وضع عشر آبار للمعايير في قالب Microelisa.في البئر 1 والبئر 2 ، يضاف 100 ميكرولتر من المحلول القياسي و 50 مايكرولتر من محلول التخفيف المعياري ويخلط جيدًا.في البئر 3 والبئر 4 ، تمت إضافة 100 مايكرولتر من محلول البئر 1 والبئر 2 على التوالي.ثم يضاف 50 مايكرولتر من محلول التخفيف المعياري ويخلط جيدًا.يتم التخلص من محلول 50 مايكرولتر من البئر 3 والبئر 4. في البئر 5 والبئر 6 ، يضاف محلول 50 مايكرولتر من البئر 3 والبئر 4 على التوالي.ثم يضاف 50 مايكرولتر من محلول التخفيف المعياري ويخلط جيدًا.في البئر 7 والبئر 8 ، تمت إضافة محلول 50 مايكرولتر من البئر 5 والبئر 6 على التوالي.ثم يضاف 50 مايكرولتر من محلول التخفيف المعياري ويخلط جيدًا.في البئر 9 والبئر 10 ، تمت إضافة محلول 50 مايكرولتر من البئر 7 والبئر 8 على التوالي.ثم يضاف 50 مايكرولتر من محلول التخفيف المعياري ويخلط جيدًا.يتم التخلص من محلول 50 مايكرولتر من البئر 9 والبئر 10. بعد التخفيف ، يكون الحجم الإجمالي في جميع الآبار 50 ميكرولتر والتركيزات هي 24 نانوغرام / مل ، 16 نانوغرام / مل ، 8 نانوغرام / مل ، 4 نانوغرام / مل و 2 نانوغرام / مل ، على التوالي .
2. في قالب Microelisa ، اترك بئرًا فارغًا كعنصر تحكم فارغ.في عينات الآبار ، تمت إضافة عينة عازلة 40 ميكرولتر وعينة 10 ميكرولتر (عامل التخفيف هو 5).يجب تحميل العينات على القاع دون لمس جدار البئر.تخلط جيدا مع الهز الخفيف.
3. الحضانة: احتضان 30 دقيقة عند 37 ℃ بعد مختومة بغشاء لوحة الإغلاق.
4. التخفيف: خفف منظف الغسيل المركز بالماء المقطر (30 مرة لـ 96T و 20 مرة لـ 48T).
5. الغسيل: انزع بعناية غشاء لوحة الإغلاق ، ونضح وأعد تعبئته بمحلول الغسيل.تخلصي من محلول الغسيل بعد الراحة لمدة 30 ثانية.كرر عملية الغسيل 5 مرات.
6. أضف 50 ميكرولتر من كاشف HRP-Conjugate لكل بئر باستثناء بئر التحكم الفارغ.
7. الحضانة كما هو موضح في الخطوة 3.
8. الغسل كما هو موضح في الخطوة 5.
9. التلوين: أضف 50 مايكرولتر من محلول الكروموجين A و 50 ميكرولتر من محلول الكروموجين B لكل بئر ، واخلطه مع الهز برفق واحتضنه عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.يرجى تجنب الضوء أثناء التلوين.
10. الإنهاء: أضف 50 ميكرولتر من محلول التوقف لكل بئر لإنهاء التفاعل.يجب أن يتغير لون البئر من الأزرق إلى الأصفر.
11. قراءة OD الامتصاصية عند 450 نانومتر باستخدام قارئ لوحة ميكروتيتر.تم تعيين قيمة OD لبئر التحكم الفارغة على أنها صفر.يجب إجراء الفحص في غضون 15 دقيقة بعد إضافة محلول الإيقاف.
دقة
دقة الفحص الداخلي (الدقة داخل الفحص): تم اختبار 3 عينات بمستوى E-Cad منخفض ومتوسط وعالي 20 مرة على لوحة واحدة ، على التوالي.
دقة الفحص الداخلي (الدقة بين المقايسات): تم اختبار 3 عينات بمستوى E-Cad منخفض ومتوسط وعالي على 3 لوحات مختلفة ، و 8 مكررات في كل لوحة.
السيرة الذاتية (٪) = SD / متوسط X100
الفحص الداخلي: CV <10٪
بين الفحص: CV <12٪
نطاق الفحص
0.6 جالون / مل -80 جالون / مل
حساسية:
0.1 بيكوغرام / مل
اتصل شخص: Mr. Steven
الهاتف :: +8618600464506
