مجموعة إيليسا لمكافحة الفيروس

اختبار المناعة الإنزيمية للكشف عن الأجسام المضادة لفيروس التهاب الكبد البشري من النوع C (HCV) RUO

فيروس التهاب الكبد C (HCV) ، والذي كان يوصف سابقاً بأنه الشكل المنتقل عن طريق الجهاز الورقية من التهاب الكبد غير A ، غير B (NANBH)¹، يصبح مرض مزمن في 50% من الحالات.²يمكن أن ينتقل فيروس HCV أيضًا من خلال تعاطي المخدرات عن طريق الوريد والاتصال المنزلي.³فيروس التهاب الكبد C هو فيروس الحمض النووي الحمض النووي ذو خيط واحد مع بعض العلاقات الهيكلية لعائلة الفلافي فيروس.توفر تسلسلات حمض النووي من استنساخات الحمض النووي المشترك لفيروس التهاب الكبد C أساس لبناء الببتيدات المتجانسة التي تمثل بروتينات فيروس التهاب الكبد C المفترضة.^4,5فحص الأجسام المضادة لفيروس التهاب الكبد C في الدم باستخدام البروتينات الاصطناعية أو التركيبةساعد في تحديد متبرعين بالدم بصحة جيدة على ما يبدو مع الأجسام المضادة لفيروس HCV الذين ربما يكونوا قد نقلوا الفيروس.⁶

هذا هو اختبار المناعة المرتبط بالأنزيم باستخدام البروتينات المتجددة المستمدة من المناطق الأساسية لفيروس HCV للكشف عن وجود أجسام مضادة لفيروس HCV في المصل البشري.

المواد المقدمة مع مجموعات:

إجراءات التقييم

يُنصح بشدة بتحليل كل عينة وعينة تحكم في نسختين. يجب أن يتوازن جميع المفاعلات إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.

1. قم بتوزيع 100 مل ((أو 3 قطرات) من مخفف العينة في آبار الاختبار الفردية.
2. قم بتوزيع 100 مل من المراقبة الإيجابية والمراقبة السلبية على علب منفصلة.
3. إضافة 10 مل من كل عينة اختبار إلى آبار اختبار مزدوجة؛ الدوران ليتم خلطه.
4. الحضانة لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية
5. اغسل كل بئر 5 مرات عن طريق ملء كل بئر بمكافئ غسيل مخفف ، ثم عكس اللوحة بقوة لإخراج كل المياه وقفل حافة الآبار على الورق الممتص لعدة ثوان.
6. إضافة 100 مل من إنزيم كونجوجات إلى كل بركة. خلطها بلطف عن طريق تدوير لوحة الميكروتيتر على مقعد مسطح لمدة دقيقة.لا تضيف Enzyme Conjugate إلى البئر الفارغ.
7. الحضانة لمدة 20 دقيقة عند 37 درجة مئوية
8. غسل الطبق 5 مرات كخطوة 5.
9. إضافة قطرة واحدة (50 مل) من محلول الركيزة A (HRP-substrate) إلى كل بئر، ثم إضافة قطرة واحدة (50 مل) من محلول الركيزة B (TMB) إلى كل بئر. خلط بلطف وحظيرة في 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. .
10. إضافة قطرة واحدة (50 مل) من محلول التوقف إلى كل بئر لوقف رد فعل اللون. اقرأ قيمة OD عند 450 نانومتر / 630 نانومتر مع قارئ لوحة المرشح المزدوجة.هناك خيار لقراءة قيمة OD عند 450 نانومتر مع قارئ لوحة المرشح الواحد. (باستخدام قيمة OD من البئر الفارغ لتصحيح كل قراءة OD من جميع الآبار)