البشرية فيتامين (د) الـ ELISأمجموعة 

الاستخدام المقصود

مجموعة "إليسا" لفيتامين د البشري لدينا هي لقياس مستويات فيتامين د في مصل البشر، البلازما، وسائل الثقافة أو أي سائل بيولوجي.

إعداد العينة

1.المصلالتعويض

بعد جمع الدم الكامل، دع الدم يتخثر بتركها دون إزعاج عند درجة حرارة الغرفة. هذا يستغرق عادة 10-20 دقيقة. إزالة الجلط عن طريق الطرد المركزي عند 2000-3،000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقةإذا ظهرت الرواسب أثناء الاحتفاظ، يجب أن تكون العينة مركزية مرة أخرى.

2.البلازمابالتعويض

يتم جمع الدم الكامل في أنابيب مع مضاد للتخثر (إدتا أو السيترات). بعد الحضانة في درجة حرارة الغرفة لمدة 10-20 دقيقة ، يتم طرد الأنابيب لمدة 20 دقيقة عند 2000-3000 دورة في الدقيقة.اجمع المادة المرتفعة بعناية كنماذج البلازماإذا ظهرت الرواسب أثناء الاحتفاظ، يجب أن تكون العينة مركزية مرة أخرى.

3.عينات البول

تجمع البول في أنابيب عفيفة. تجمع السوبرناتانت بعناية بعد الطرد المركزي لمدة 20 دقيقة عند 2000-3000 دورة في الدقيقة. إذا ظهرت السباتات أثناء الاحتفاظ،يجب أن يتم طرد العينة من المركز مرة أخرىإجراءات تحضير السائل الشوكي والسائل البليروبريتونيال هي نفس إجراءات تحضير عينة البول.

4.عينات الخلايا

إذا كنت ترغب في اكتشاف إفرازات الخلايا، فلتجمع المادة المرتفعة في أنابيب تعفيزية. قم بجمع المادة المرتفعة بعناية بعد الطرد المركزي لمدة 20 دقيقة عند 2000-3000 دورة في الدقيقة.إذا كنت تريد أن تكتشف المكونات داخل الخليةتم تخفيف الخلايا إلى 1 × 100 / مل مع PBS (pH 7.2- 7.4). تم تدمير الخلايا لتحرير المكونات داخل الخلية عن طريق التجميد المتكرر والذوبان.تجمع المادة فوق الحرارة بعناية بعد الطرد المركزي لمدة 20 دقيقة عند 2،000-3000 دورة في الدقيقة. إذا ظهرت الرواسب أثناء الحجز ، يجب أن يتم طرد العينة مرة أخرى.

5.عينات الأنسجة

يتم تقطيع عينات الأنسجة وتوزيعها وتجميدها في النيتروجين السائل وتخزينها عند -80 درجة مئوية لاستخدامها في المستقبل. تم تجانس عينات الأنسجة بعد إضافة PBS (pH 7.4). يجب تشغيل العينات عند 4 درجات مئوية.تجمع المادة فوق الحرارة بعناية بعد الطرد المركزي لمدة 20 دقيقة عند 21000-3000 دورة في الدقيقة. أليكوت السوبرناتنت لتحليل ELISA والاستخدام المستقبلي.

المواد المقدمة مع kهو

ملاحظات:

• تخزين المجموعة عند 4 درجة مئوية عند استلامها. يجب أن تكون المجموعة متوازنة إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاختبار. إزالة أي شريطات غير ضرورية من لوحة مغلفة بأجسام مضادة لفيتامين د البشري.إعادة إغلاقها في ورق زيب لوك وتخزينها عند 4 درجة مئوية.
• قد تظهر هباءات في عازل الغسيل المركز. يرجى تسخين العازل لحل جميع هباءات، مما لن يؤثر على النتائج.
• يجب استخدام أنبوب دقيق لتجنب الأخطاء التجريبية. يجب إضافة العينات إلى الصفيحة الدقيقة في أقل من 5 دقائق. إذا تم تضمين عدد كبير من العينات،يوصى باستخدام البيبطة متعددة القنوات.
• يجب تضمين المنحنى القياسي في كل تحليل. يوصى بإعادة البئر. إذا كانت قيمة OD للعينة أكبر من أول بئر من المعايير،يرجى تخفيف العينة (ن مرات) قبل الاختبارعند حساب تركيز فيتامين د الأصلي، يرجى مضاعفة عامل التخفيف الإجمالي (XnX5).
• من أجل تجنب التلوث المتقاطع ، يجب استخدام أغلفة Microplate مرة واحدة فقط.
• الرجاء إبقاء الجذع بعيدا عن الضوء
• يجب أن تكون جميع العمليات وفقا لتعليمات الشركة المصنعة بدقة.
• يجب التعامل مع جميع العينات، ومواد الغسيل والنفايات كعوامل معدية.
• يجب عدم خلط المفاعلات من مجموعات مختلفة.