مجموعة الكشف عن فيروس الورم الحليمي البشري لـ HPV Multiplex إرشادات PCR في الوقت الحقيقي

مجموعة اكتشاف فيروس الورم الحليمي البشري ((PCR متعدد في الوقت الحقيقي)

الاستخدام المقصود

هذه المجموعة مخصصة للكشف النوعي في المختبر عن الأحماض النووية لـ 18 نوعًا من أنواع فيروس الورم الحليمي البشري عالية الخطورة (16,18,26,31,33,39,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73،82) في الخلايا المفصلة في عنق الرحم،وتصنيف الجينات للأنواع 16 و 18 من فيروس الورم الحليمي البشري. يستهدف زوج إضافي من البرايمر والمسبار جين الغلوبين البشري لتوفير التحكم في العملية.

ملخص

• فيروس الحمض النووي البشري (HPV) ، ينتمي إلى عائلة Papillomaviridae، هو فيروس الحمض النووي الصغير الدائري غير المغطى ، ذو السلاسل المزدوجة ، مع طول الجينوم حوالي 8000 زوج قاعدة (bp).عدوى فيروس الورم الحليمي البشري شائعة جداً في النساءحوالي 80% من النساء قد أصيبن بفيروس الورم الحليمي البشري في حياتهن و 90% منهم يمكن أن يزول بشكل طبيعي خلال سنة إلى سنتين.يتم تصنيف فيروسات الورم الحليمي البشري باعتبارها منخفضة الخطر، المرتبطة بالثآليل الحميدة أو الآفات الجلدية ، أو عالية الخطر ، والتي يمكن أن تسبب أوروفارينجية والسرطانات الخبيثة ، بما في ذلك سرطانات عنق الرحم والفامة والفم.أنواع فيروس الورم الحليمي البشري عالية الخطورة (hrHPV) مسؤولة عن ~ 5% من جميع أنواع السرطان البشري ويتم اكتشافها في 99.7% من حالات سرطان عنق الرحم، رابع أكثر أنواع السرطان شيوعًا لدى النساء، ويمثل 7.5% من جميع الوفيات المرتبطة بالسرطان بين النساء في جميع أنحاء العالم سنويًا.

المعلمات التقنية:

المبدأ

تم استخدامه للكشف النوعي عن 18 من الحمض النووي الحمض النووي لفيروس الورم الحليمي البشري عالية الخطورة (HPV16،18,26,31,33,39,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73،82) in vitro في خلايا إزالة عنق الرحم ، وتصنيف أنواع HPV16 و 18.

يحتوي نظام تفاعل تضخيم PCR من هذه المجموعة أيضًا على Uracil-N-Glycosylase ويمكن أن يكسر ارتباط uracil glycosiside بشكل انتقائي في جزء PCR الذي يحتوي على dUTP ،الحد الفعال من النتائج الإيجابية الكاذبة بسبب تلوث منتج PCR.

إجراء الاختبار

1تحضير المفاعل

1) أخرج(ب)أوسيتيفجالتحكم(المجفف بالمجمد)نقله إلى منطقة معالجة العينات

2) أخرج (n+2)شريط مضاد لفيروس الورم الحليمي (المجفف بالمجمد)، تمزق كيس التعبئة، ووضع الشرائط ذات الأنبوبات الثمانية التي تحمل الأرقام من 1 إلى 8، على رف PCR، وإزالة سدادة السيليكون.

ملاحظة:

• n هو حجم العينة
• يجب أن يحتوي كل اختبار PCR على PC واحد (مراقبة إيجابية) و NTC واحد (مراقبة سلبية).

3) إضافة 20 ميكرو لتر من الماء الخالي من النوكلياز في الأنبوب 1 إلى 8 منشريط مضاد لفيروس الورم الحليمي (المجفف بالمجمد)وأغلقTغطاءلنقل المفاعل إلى منطقة معالجة العينات. علامة الشرائط مع S1، S2... Sn، NTC، PC.

2إعداد العينةو تحضير التحكم الإيجابي

1)إذا تم استخدام محلول استخراج العينة GPDX ((NO. 600220) ، استنشاق 1mL من العينة ، الطرد المركزي عند 12000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقتين ، والتخلص من السوبرنيتانت ، وإضافة 100uL أساس لتحرير الأحماض النووية ،حمام معدني 95 درجة مئوية لمدة 10 دقائق، الطرد المركزي عند 12000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقتين، والتحويل إلى الحمض النووي.

2) إذا لم يكن محلول استخراج عينة GPDX ((NO. 600220) متاحًا ، فمن المستحسن استخدام مجموعة استخراج حمض GPDX النووي (No. 600210) ، راجع دليل الإرشادات.

3) أضف 200 ليتر من الماء الخالي من النوكلياز إلىالتحكم الإيجابي (المجفف بالمجمد) ,ثم تدور لمدة دقيقتينحلولإيجابيةجالتحكميجب أن تكون في دوامة ويتم خلطها جيدا قبل الاستخدام.

ملاحظة:

الـP المحللةأوسيتيفجالتحكميجب أن يتم تخزينها عند -20±5°C.

3إضافة عينةs

1) أخرج (n + 2) شريط من المفاعل (n للعينات، NTC و PC) ، و أطلق الطرد المركزي عند 3000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة لتركيز كل المفاعل في القاع.ثم كشف الغطاء بلطف قبل الاستخدام.

إضافة 5 ميكرو لترات من الحمض النووي من العينة 1 إلى الأنبوب 1، وتغطية أنابيب الـ PCR. إعداد شريط العينة الآخر، NTC وشرطة PC بنفس الطريقة التي تم بها في العينة 1.

2) الطرد المركزي عند 3000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة لتركيز كل المفاعل في القاع.

3) وضعشريط مضاد لفيروس الورم الحليميفي نظام PCR في الوقت الحقيقي وإعداد برنامج رد الفعل وفقًا للجدول 2

الدعم والخدمات:

يأتي منتجنا المُستجيب لـ PCR مع دعم تقني ومُخصص وخدمات لضمان قدرة عملائنا على استخدام المنتج وتحسينه إلى أقصى قدر من إمكانياته.فريقنا من الخبراء متاح للإجابة على أي أسئلة تقنية وإصلاح أي مشاكل قد تنشأ أثناء استخدام المنتجبالإضافة إلى ذلك، نحن نقدم التدريب والموارد التعليمية لمساعدة العملاء على تحسين فهمهم للمنتج وتطبيقاته.هدفنا هو توفير تجربة شاملة وسلس للعملاء، من الشراء الأولي إلى الدعم المستمر والصيانة.

التعبئة والشحن

تغليف المنتج:

• سيتم تعبئة منتج Reagent PCR في علبة عقيمة مغلقة.
• سوف تكون العبوة الملصقة باسم المنتج ورقم اللعبة وتاريخ انتهاء الصلاحية.
• سيتم تعبئة القارورة في كيس بلاستيكي مغلق لمنع التلوث أثناء الشحن.

الشحن:

• سيتم شحن منتج Reagent PCR في حاوية ذات درجة حرارة خاضعة للسيطرة للحفاظ على استقرار المنتج.
• سيتم وضع علامة على حاوية الشحن مع اسم المنتج ورقم المجموعة وتاريخ انتهاء الصلاحية.
• سيتم شحن المنتج عن طريق خدمة خدمة سريعة موثوقة لضمان التسليم في الوقت المناسب والآمن.