فيتامين B12مجموعة اختبار ELISA
أسماء الأدوية
الاسم العام:VB12 مجموعة ELISA
الغرض
تسمح هذه المجموعة بتحديد تركيزات VB12 في العينة.
مبدأ الاختبار
يستخدم المجموعة مسابقة ELISA لقياس مستوى VD في العينة، يستخدم الجسم المضاد لل VD المنظف
لتغطية الآبار الصفيحة microtiter، جعل الجسم المضاد في المرحلة الصلبة، إضافة VD والجسم المضاد الذي مع HRP
معلّق بـ VD إلى آبار ميكروتيتير مطلية، تجعلها تنافسية
تماما، إضافة TMB محلول الركيزة. عمق اللون و VD من العينة
مرتبطة إيجابياً، قياس الكثافة البصرية (OD) عند 450 نانومتر مع قارئ لوحات microtiter،
حساب تركيزات VD عن طريق المنحنى القياسي.
| تفاصيل المنتج |
الوصف |
| التسليم |
خلال 48 ساعة |
| مواصفات التعبئة |
8 × 12 شريط، 96 بئر |
| بلد المنشأ |
الصين |
| المصنع |
18 شهراً |
| طريقة الحفاظ |
2°C-8°C |
| العينة |
دم كامل |
| التشنج |
الفئة 1 |
| النوع |
مجموعة اختبار اليزا |
مبدأ الاختبار
المواد المقدمة مع مجموعة
| 1 |
محلول غسيل |
20 مل × 1 زجاجة |
8
|
1 معيار ((48nmol/L) |
0.5ml × 1 زجاجة |
| 2 |
مادة التفاعل المرتبطة بـ HRP |
6 مل × 1 زجاجة |
2 معيار ((24 نمول/لتر)) |
0.5ml × 1 زجاجة |
| 3 |
ميكروليسا ستريبليت |
12 حسنا × 8 أشرطة |
3 معيار ((12 نمول/لتر) |
0.5ml × 1 زجاجة |
| 4 |
أوقف الحل |
6 مل × 1 زجاجة |
4 معيار ((6nmol/L) |
0.5ml × 1 زجاجة |
| 5 |
محلول الكروموجين A |
6 مل × 1 زجاجة |
5 معيار ((3nmol/L) |
0.5ml × 1 زجاجة |
| 6 |
محلول الكروموجين B |
6 مل × 1 زجاجة |
9 |
دليل المستخدم |
1 |
| 7 |
مادة تخفيف العينة |
6 مل × 1 زجاجة |
10 |
غشاء لوحة الإغلاق |
2 |
إجراءات التقييم
1إضافة عينة:ضع البئر الفارغة بشكل منفصل (بئر المقارنة الفارغة لا تضيف عينة و
تجريب الايليزا، غير كل عملية خطوة هي نفسها.
تخفيف 40μl إلى عينات الاختبار بشكل جيد والتي على لوحات ELISA مغلفة ، ثم إضافة عينة الاختبار
10μl (درجة التخفيف النهائية للعينة هي 5 مرات) ، أضف العينة إلى قاع لوحات ELISA
لمسة جدار البئر بقدر المستطاع، ومزج بلطف.
2إضافة إنزيم:إضافة مفاعلات ELISA 50μl إلى كل بئر، باستثناء البئر الفارغ.
3الحضانة: بعد إغلاق الصفيحة مع غشاء الصفيحة المغلقة، الحضانة لمدة 30 دقيقة عند 37 °C.°C.
4تكوين السائل: 30 مرة من غسل تركيز 30 مرة مخففة بالماء المقطر
احتياطي.
5. غسيل:كشف غشاء لوحة الإغلاق ، والتخلص من السائل ، وجفاف عن طريق التأرجح ، وإضافة غسل
عازل كل بئر، لا تزال لمدة 30 ثانية ثم إزالة، كرر 5 مرات، جافة من خلال ضرب.
6اللون:إضافة عامل لون A 50μl و عامل لون B 50μl إلى كل بئر. مزج بعناية، الحضانة
لمدة 10 دقائق عند 37°C.
7أوقف رد الفعل:إضافة حل توقف50μl لكل بئر، وقف التفاعل ((اللون الأزرق
تغير لونه إلى اللون الأصفر فوراً).
8. الاختبار:خذ البيضاء على أنها صفر ، وقياس الكثافة البصرية (OD) عند 450 نانومتر بعد إضافة
أوقف الحل وخلال 15 دقيقة
الحساب
نأخذ الكثافة القياسية للأفقية، وقيمة OD للرأسية،
المنحنى القياسي على ورقة الرسوم البيانية، معرفة الكثافة المقابلة وفقا للعينة
قيمة OD من خلال منحنى العينة، مضروبة بمضاعف التخفيف، أو حساب الخط المستقيممعادلة تراجع المنحنى القياسي مع الكثافة القياسية وقيمة OD ، مع
قيمة OD للعينة في المعادلة، حساب كثافة العينة، مضروبة في خفض
مضاعفة، والنتيجة هي الكثافة الفعلية للعينة.
ملاحظات مهمة
- يجب أن تخرج مجموعة من البيئة التبريدة وتتوازن لمدة 15-30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة ثم استخدام، لوحات ELISA مغلفة إذا لم تستخدم بعد فتح،يجب تخزين اللوحة في كيس مغلق.
- الغسيل العازل سوف التبلور الفصل، يمكن أن تكون ساخنة الماء يساعد على إذابة عندما
الغسل لا يؤثر على النتيجة
- إضافة عينة مع عينة كل خطوة، وقراءة الدقة لها في كثير من الأحيان، وتجنب الخطأ التجريبي. إضافة عينة في غضون 5 دقائق، إذا كان عدد العينة هو الكثير ، نوصي باستخدام Volley.
- الرجاء جعل منحنى المواصفات عند تحليل، كان من الأفضل أن تجعل النسخة المكررة جيدا،إذا كان محتوى مادة الاختبار في العينة مرتفعًا بشكل مفرط (معدل OD للعينة أكبر من معدل OD للبرة القياسية الأولى)يرجى استخدام خفض العينة لتخفيف مضاعفات معينة (n مرات) ، ثم تحليل. يرجى مضاعفة مجموع مرات التخفيف عند حساب ((×n×5).
- غشاء لوحة الإغلاق يحد فقط من الاستخدام مرة واحدة، لتجنب التلوث المتداخل.
- الركيزة يرجى تجنب الحفاظ على الضوء.
- الرجاء وفقا لتعليمات الاستخدام بدقة، يجب أن تأخذ تحديد نتائج الاختبار قارئ لوحة microtiter كمعيار.
- يجب أن تكون جميع العينات، ومواد الغسيل وكل نوع من النفايات وفقا لعملية المواد المعدية.
- هذا المفاعل الذي لا يختلط مع مكونات مختلفة من أرقام الشرائح.
- إذا كان هذا مختلفاً عن تعليم اللغة الإنجليزية، خذ تعليم اللغة الإنجليزية كمعيار.
التخزين والاستقرار
• تخزين عند 2- 8 درجات مئوية.
• أغلق واسترجع المفاعلات غير المستخدمة إلى 2- 8 درجة مئوية، في ظل هذه الظروف ستبقى الاستقرار لمدة شهرين، أو حتى تاريخ انتهاء الصلاحية المكتوب على الملصق، أيهما أقدم.
