مجموعة اختبار فيتامين E Elisa

أسماء الأدوية

الاسم العام: مجموعة اختبار فيتامين E Elisa

الغرض

هذه المجموعة تستخدم لتحديد تركيزات VE في العينة.

مبدأ الاختبار

يستخدم المجموعة مسابقة (إليسا) لتحديد مستوى (في) في العينة، يستخدم مضادات (في) المطهرة لتغطية صفيحة (ميكروتيتير)إضافة VE والجسم المضاد الذي مع HRP الملصق VE إلى أوعية microtiter مغلفةبعد غسيل كامل، إضافة محلول التربة TMB. عمق اللون و VE العينة كانت مرتبطة إيجابيا،قياس الكثافة البصرية (OD) عند 450 نانومتر بقارئ لوحة microtiter، حساب تركيز VE عن طريق المنحنى القياسي.

متطلبات العينات

10 غشاء لوحة الإغلاق 2 1

1.عملية أخذ العينات:

(1) تمت تكرار دورات التجميد والذوبان للم عينات المائية ثلاث مرات بعد الاستخراج. ثم تم تصفيتها بألياف الزجاج ، المرجعية.

(2) عينات الأنسجة مع n-butanol: الميثانول: الماء (5:25:70 V: V: V) استخراج، أو استخراج وفقا للأدبيات ذات الصلة. تجربة في أقرب وقت ممكن بعد الاستخراج..

2لا يمكن اكتشاف العينة التي تحتوي على NaN3 لأن NaN3 يمنع نشاط HRP.

الغسل لا يؤثر على النتيجة

إجراءات التقييم

• إضافة عينة: إضافة عينات فارغة بشكل منفصل (لا تضيف عينات مقارنة فارغة ومعامل ELISA ، غير أن كل عملية خطوة هي نفسها).إضافة خفض العينة 40μl إلى عينة الاختبار التي على لوحات ELISA مغلفةثم إضافة عينة الاختبار 10μl (درجة التخفيف النهائية للعينة هي 5 مرات) ، إضافة عينة إلى قاع لوحات ELISA مغلفة جيدا ، لا تلمس الجدار بقدر الإمكان ، ومزج بعناية.
• إضافة إنزيم:إضافة مفاعلات ELISA 50μl إلى كل حبة، باستثناء الحبة الفارغة. الحضانة: بعد إغلاق لوحة مع غشاء لوحة الإغلاق ، الحضانة لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية.
• تشكيل السائل: 30 مرة من غسل المركزية مخففة 30 مرة بالماء المقطر والاحتياطي.
• غسل:كشف غشاء لوحة الإغلاق، التخلص من السائل، الجفاف عن طريق التأرجح، إضافة عازل الغسيل إلى كل وزن، استمر لمدة 30 ثانية ثم إزالة، كرر 5 مرات، جفاف عن طريق ضرب.
• لون: أضف لون A 50μl و لون B 50μl إلى كل لون. خلط بلطف، وتحميل لمدة 10 دقائق عند 37 درجة مئوية.
• أوقف التفاعل: أضف محلول Stop50μl إلى كل حبة، أوقف التفاعل ((تغير اللون الأزرق إلى اللون الأصفر على الفور).
• اختبار:خذ المادة الفارغة كصفر، وقياس الكثافة البصرية عند 450 نانومتر بعد إضافة محلول التوقف وخلال 15 دقيقة.

التخزين والاستقرار

• تخزين عند 2- 8 درجات مئوية.

• أغلق واسترجع المفاعلات غير المستخدمة إلى 2- 8 درجة مئوية، في ظل هذه الظروف ستبقى الاستقرار لمدة شهرين، أو حتى تاريخ انتهاء الصلاحية المكتوب على الملصق، أيهما أقدم.