اسم المنتج

مجموعة الكشف عن فيروس شيكونغونيا (CHIKV) في الوقت الحقيقي RT-PCR

الاستخدام المقصود

من أجلفي المختبرالكشف النوعيفيروس الشيكونغونيافي خلايا الدم البشرية، البلازما، أو عينات الدم الكامل. مصممة للتشخيص السريري، والمراقبة، والتحقيقات في تفشي حمى الشيكونغونيا.

المعلمات التقنية:

مبدأ الاختبار

• RT-PCR في الوقت الحقيقي: تستهدف المناطق المحافظة من جينوم CHIKV (مثلE1,nsP1، أوnsP4الجينات) باستخدام البرايمر الخاص بالسلسلة والمسبارات الفلوريسنتية (على سبيل المثال ، FAM).

• قدرة متعددة: يمكن أن تشملالتحكم الداخلي(على سبيل المثال، RNase P) لمراقبة استخراج RNA وتضخيمه، مما يقلل من النتائج السلبية الكاذبة.

مكونات المجموعة

1. مزيج RT-PCR الرئيسي: يحتوي على نسخة النسخ العكسية ، Taq DNA polymerase ، dNTPs ، ومعازل محسّنة.

2. خليط البرايمر/المسبار: أوليغونيوكليوتيدات CHIKV المحددة باستخدام أجهزة الفلورسنت (على سبيل المثال ، FAM لـ CHIKV ، HEX / VIC لـ IC).

3. التحكم:

   • التحكم الإيجابي: RNA CHIKV غير نشط أو التحكم الاصطناعي

   • التحكم السلبي: الماء الخالي من النواة أو المصفوفة البشرية السلبية

   • التحكم الداخلي(إذا ما تم تضمينها).

4. مُستجيبات أخرى: DNase/RNase-free water، أنابيب تفاعلية (إن وجدت).

سير العمل

1. إعداد العينة: استخراج الحمض النووي الريبوزي الفيروسي (متوافق مع معظم أدوات الاستخراج ، على سبيل المثال ، QIAamp ، MagMAX).

2. إعداد PCR: خلط الحمض النووي الريبوزي المستخرج مع الخليط الرئيسي والبايمرات/المسبارات.

3. التضخيم:

   • النسخة العكسية: 50 درجة مئوية لمدة 1015 دقيقة.

   • تنشيط الـ PCR: 95 درجة مئوية لمدة 2-5 دقائق.

   • الدورة الدورية: 40~45 دورة من 95°C (10 ثواني) → 60°C (30~60 ثواني، قراءة الفلوريسانس).

4. تحليل: قيم دورة الحد الأدنى (Ct) التي يتم تحديدها بواسطة برنامج الأداة.

خصائص الأداء

• الحساسية: ≤100 نسخة/مل (95% LOD).

• الخصوصية: لا يوجد تفاعل متقاطع مع دينغي، زيكا، الحمى الصفراء، أو غيرها من الفيروسات.

• وقت التحول: حوالي ساعتين (بعد الاستخراج).