الاختبار السريع لمستضد الإيبولا هو اختبار مناعي كروماتوغرافي سريع ومصل وتدفق جانبي للكشف النوعي عن المستضدات
من فيروسات الإيبولا في عينات الدم أو المصل أو البلازما البشرية الكاملة كوسيلة مساعدة في تشخيص عدوى فيروس الإيبولا.
ملخص
يسبب فيروس الإيبولا مرضًا حادًا وخطيرًا غالبًا ما يكون مميتًا إذا لم يتم علاجه. ظهر مرض فيروس الإيبولا (EVD) لأول مرة في عام 1976 في 2
تفشي المرض في وقت واحد، أحدهما في نزارا، السودان، والآخر في يامبوكو، جمهورية الكونغو الديمقراطية. الأخير وقع في أ
قرية قريبة من نهر الإيبولا، ومنه أخذ المرض اسمه.
تظهر الصور المجهرية الإلكترونية لأعضاء جنس فيروس الإيبولا أن لديهم بنية خيطية مميزة للفيروس الخيطي. إيبوف
يبلغ طول VP30 حوالي 288 حمضًا أمينيًا. تكون الفيروسات أنبوبية بشكل عام ولكنها متغيرة في الشكل العام وقد تظهر على شكل
معوج الراعي الكلاسيكي أو مسمار ذو عروة، على شكل حرف U أو 6، أو ملفوف أو دائري أو متفرع؛ التقنيات المخبرية، مثل الطرد المركزي، قد
يكون أصل بعض هذه التشكيلات. يبلغ قطر الفيروسات بشكل عام 80 نانومتر مع طبقة دهنية ثنائية تثبت البروتين السكري
يعرض طفرات طويلة من 7 إلى 10 نانومتر من سطحه. وهي ذات أطوال متغيرة، عادةً حوالي 800 نانومتر، ولكن قد يصل طولها إلى 1000 نانومتر.
يوجد في مركز الفيريون بنية تسمى القفيصة النووية، والتي تتكون من الحمض النووي الريبوزي الجينومي الفيروسي الملتف بشكل حلزوني والمعقد مع
البروتينات NP وVP35 وVP30 وL. ويبلغ قطرها 80 نانومتر وتحتوي على قناة مركزية يبلغ قطرها 20-30 نانومتر. فيروسيا
توجد نتوءات بروتينية سكرية مشفرة بطول 10 نانومتر ومسافة 10 نانومتر على الغلاف الفيروسي الخارجي للفيريون، وهو مشتق
من غشاء الخلية المضيفة. بين الغلاف والقفيصة النووية، في ما يسمى بمساحة المصفوفة، تكون البروتينات الفيروسية VP40 وVP24
يقع.
تضم عائلة الفيروسات الخيطية ثلاثة أجناس: فيروس كويفا، فيروس ماربورغ، وفيروس إيبولا. هناك 5 أنواع تم تحديدها:
زائير، بونديبوجيو، السودان، غابات ريستون وتاي. الثلاثة الأولى، فيروس إيبولا بونديبوجيو، فيروس إيبولا زائير، وفيروس إيبولا السودان
ارتبطت بفاشيات كبيرة في أفريقيا. ينتمي الفيروس الذي تسبب في تفشي المرض في غرب أفريقيا عام 2014 إلى فصيلة زائير.
ينتشر فيروس الإيبولا بعد ذلك من خلال انتقاله من إنسان إلى إنسان عن طريق الاتصال المباشر (من خلال الجلد المكسور أو الأغشية المخاطية) مع
الدم أو الإفرازات أو الأعضاء أو سوائل الجسم الأخرى للأشخاص المصابين، ومع الأسطح والمواد (مثل الفراش والملابس)
ملوثة بهذه السوائل.
فترة الحضانة، أي الفترة الزمنية من الإصابة بالفيروس إلى ظهور الأعراض، هي من 2 إلى 21 يومًا. البشر ليسوا كذلك
المعدية حتى ظهور الأعراض. الأعراض الأولى هي الظهور المفاجئ للحمى والإرهاق وآلام العضلات والصداع والتهاب الحلق.
ويعقب ذلك القيء والإسهال والطفح الجلدي وأعراض اختلال وظائف الكلى والكبد، وفي بعض الحالات، أعراض داخلية وداخلية.
نزيف خارجي (على سبيل المثال، ناز من اللثة، دم في البراز). وتشمل النتائج المختبرية انخفاض عدد خلايا الدم البيضاء والصفائح الدموية
وارتفاع انزيمات الكبد.
قد يكون من الصعب التمييز بين مرض فيروس الإيبولا والأمراض المعدية الأخرى مثل الملاريا وحمى التيفوئيد والتهاب السحايا. تأكيد ذلك
يتم إجراء الأعراض الناجمة عن الإصابة بفيروس الإيبولا باستخدام التحقيقات التالية:
⚫
مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)
⚫
اختبارات الكشف عن التقاط المستضد
⚫
اختبار تحييد المصل
⚫
مقايسة تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR).
⚫
المجهر الإلكتروني
⚫
عزل الفيروس عن طريق زراعة الخلايا.
تشكل العينات المأخوذة من المرضى خطرًا بيولوجيًا شديدًا؛ يجب إجراء الاختبارات المعملية على العينات غير المعطلة بموجب
أقصى ظروف الاحتواء البيولوجي.
الاختبار السريع لمستضد الإيبولا هو اختبار نوعي بصري بسيط يكتشف مستضد فيروس الإيبولا في الدم البشري الكامل أو المصل أو
عينات البلازما يعتمد هذا الاختبار على التحليل اللوني المناعي ويمكن أن يعطي نتيجة خلال 15-20 دقيقة.
مبدأ الاختبار
اختبار مستضد الإيبولا السريع هو اختبار مناعي نوعي قائم على الغشاء للكشف عن المستضدات من فيروسات الإيبولا في
عينات الدم البشري الكامل أو المصل أو البلازما. بعد إضافة العينة إلى بئر العينة (S) على لوحة العينة، فإنها تتحرك
من خلال الوسادة المترافقة وتعبئة المتقارن الذهبي المضاد للإيبولا والمغلف على الوسادة المترافقة. يتحرك الخليط على طول
الغشاء عن طريق العمل الشعري ويتفاعل مع الجسم المضاد المضاد للإيبولا والمغلف في منطقة خط الاختبار (T). إذا كانت العينة تحتوي على
مستضد فيروس الإيبولا، سيظهر خط ملون في منطقة خط الاختبار (T)، يشير إلى نتيجة إيجابية. إذا كانت العينة لا تحتوي على
مستضد فيروس الإيبولا، لن يظهر خط ملون في هذه المنطقة، مما يشير إلى نتيجة سلبية. يتم تضمين مراقبة الجودة الداخلية في
الاختبار، على شكل خط ملون يظهر في منطقة خط التحكم (C)، مما يدل على أن الاختبار وظيفي وصحيح وكافي
تم تطبيق حجم العينة لتمكين الانتقال عبر خط الاختبار والتحكم، بغض النظر عما إذا كان هناك خط اختبار أو
لا. إذا لم يظهر خط التحكم (C) خلال مدة الاختبار تكون نتيجة الاختبار غير صالحة ويجب إعادة الاختبار باختبار جديد
جهاز.
المواد المقدمة
⚫
25 × جهاز اختبار مغلف بشكل فردي بمادة مجففة
⚫
2 × عينة مخففة (6 مل)
⚫
25 × قطارة (30 ميكرولتر)
⚫
1 × إدراج الحزمة