تفاصيل المنتج:
|
عينة: | مصل | تخزين: | 2-8 ℃ |
---|---|---|---|
EXP: | 24 شهرا | بحجم: | 96 اختبار / كيت |
إبراز: | اختبار إليسا لمكافحة الغدة الدرقية بيروكسيديز,مجموعات اختبار الأجسام المضادة TPO,مجموعة اختبار مكافحة TPO إليسا |
مجموعة إليسا المضادة لبيروكسيداز الغدة الدرقية المضادة لـ TPO
1. الاستخدام المقصود
المقايسة المناعية للتحديد الكمي في المختبر للأجسام المضادة لبيروكسيداز الغدة الدرقية في مصل الدم البشري.يستخدم تحديد مضادات ‐ TPO كعامل مساعد في تشخيص أمراض الغدة الدرقية المناعية الذاتية.
2. ملخص
3. مبدأ الاختبار
الطريقة غير المباشرة ، المدة الإجمالية للمقايسة: 70 دقيقة.
يستخدم Anti-TPO ELISA طور صلب ، طريقة ELISA غير مباشرة للكشف عن الأجسام المضادة لـ TPO في إجراء حضانة من خطوتين.شرائح البوليسترين الدقيقة مغلفة مسبقًا بمستضدات TPO البشرية عالية التأثير المناعي.أثناء خطوة الحضانة الأولى ، سوف ترتبط الأجسام المضادة الخاصة بمضادات TPO ، إن وجدت ، بمولدات المضاد TPO المطلية مسبقًا بالطور الصلب.تُغسل الآبار لإزالة بروتينات المصل غير المربوطة ، وتُضاف الأجسام المضادة IgG المضادة للإنسان في الأرانب (المضادة لـ IgG) المرتبطة بإنزيم الفجل الحار بيروكسيديز (HRP- المتقارن).أثناء خطوة الحضانة الثانية ، سترتبط هذه الأجسام المضادة المقترنة بـ HRP بأي معقدات للأجسام المضادة (IgG) تكونت مسبقًا ثم تتم إزالة اقتران HRP غير المنضم عن طريق الغسيل.تتم إضافة محاليل الكروموجين التي تحتوي على Tetramethylbenzidine (TMB) وبيروكسيد اليوريا إلى الآبار وفي وجود مركب مناعي ضد الأجسام المضادة لـ IgG (HRP) ، يتم تحلل الكروموجينات عديمة اللون بواسطة اقتران HRP المرتبط بمنتج أزرق اللون.يتحول اللون الأزرق إلى اللون الأصفر بعد إيقاف التفاعل مع حامض الكبريتيك.
يمكن قياس مقدار كثافة اللون ويتناسب مع كمية الجسم المضاد الملتقطة في الآبار ، وكمية الجسم المضاد في العينة على التوالي.
4. الكواشف المواد المقدمة
• صفيحة ميكروسكوبية مطلية ، 8 × 12 شريط ، 96 بئراً.مغلفة مسبقًا بمستضد TPO البشري.
• أجهزة معايرة ، 6 قوارير ، 1 مل لكل منها ، جاهزة للاستخدام ؛التركيزات: 0 (A) ، 25 (B) ، 50 (C) ، 100 (D) ، 250 (E) و 500 (F) IU / mL.
• إنزيم متقارن ، قارورة واحدة ، 11.0 مل من HRP (بيروكسيديز الفجل) المسمى بالأجسام المضادة IgG المضادة للإنسان في الأرانب (مضاد IgG) في محلول Tris-NaCl الذي يحتوي على BSA (ألبومين مصل البقر).يحتوي على 0.1٪ مادة حافظة ProClin300.
• Serum Diluent: قارورة واحدة ، 11 مل.تحتوي على أملاح عازلة وصبغة
• محلول غسيل مركز ، قارورة واحدة ، 25 مل (40X مركز) ، محلول غسيل PBS-Tween.
• مادة سفلية ، قارورة واحدة ، 11 مل ، جاهزة للاستخدام ، (رباعي ميثيل بنزيدين) TMB.
• إيقاف المحلول ، قارورة واحدة ، 6.0 مل من 1 مول / لتر حامض الكبريتيك.
• IFU ، 1 نسخة.
• غطاء الطبق: 2 قطعة.
المواد المطلوبة (لكن لم يتم توفيرها)
• قارئ صفيحة ميكروسكوبية بقدرة امتصاص بطول موجي 450 نانومتر و 620 نانومتر.
• غسالة ميكروسكوبية.
• حاضنة.
• شاكر لوحة.
• الماصات الدقيقة والماصات الدقيقة متعددة القنوات توفر 50 ميكرولتر بدقة أفضل من 1.5٪.
• ورق ماص.
• ماء مقطرة
5. إجراء الاختبار
• استخدم فقط عدد الآبار المطلوبة وقم بتهيئة آبار الصفيحة الدقيقة لكل معايرة وعينة ليتم معايرتها.
• أضف 100 ميكرولتر من أجهزة المعايرة إلى كل بئر.
• أضف 100 ميكرولتر من عينة المخفف (اللون الأخضر) لكل بئر باستثناء آبار المعاير.
• أضف 10 ميكرولتر من العينة إلى كل عينة بئر مخفف (ملاحظة: ستتحول الكواشف الموجودة في الآبار إلى اللون الأزرق من الأخضر) ، ثم رجها لمدة 30 ثانية.
• قم بتغطية الطبق بغطاء لوحة واحتضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
• تخلص من محتويات الصفيحة الدقيقة عن طريق الصب أو الشفط.في حالة الصب ، اضغط على اللوح وجففه بورق ماص.
• أضف 350 ميكرولتر من محلول الغسيل والصب (الصنبور والصبغ) أو نضح.كرر 4 مرات إضافية ليصبح المجموع 5 غسلات.في نهاية الغسيل ، اقلب اللوحة واضغط على أي محلول غسيل متبقي على ورق ماص.
• أضف 100 ميكرولتر من الإنزيم المتقارن ،
• قم بتغطية الطبق بغطاء لوحة واحتضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
• أضف 350 ميكرولتر من محلول الغسيل والصب (الصنبور والصبغ) أو نضح.كرر 4 مرات إضافية ليصبح المجموع 5 غسلات.في نهاية الغسيل ، اقلب اللوحة واضغط على أي محلول غسيل متبقي على ورق ماص.
• أضف 100 ميكرولتر من الركيزة إلى كل بئر.يغطى ويحضن في درجة حرارة محيطة (18-25 ℃) في الظلام للتفاعل لمدة 10 دقائق.لا تهز اللوحة بعد إضافة فرعية.
• أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف لكل بئر.
• رجّ لمدة 15-20 ثانية لخلط السائل داخل الآبار.من المهم التأكد من أن اللون الأزرق يتغير إلى اللون الأصفر تمامًا.
• اقرأ امتصاص كل بئر عند 450 نانومتر (باستخدام 620 إلى 630 نانومتر كطول موجي مرجعي لتقليل عيوب البئر) في قارئ لوحة ميكروية.يجب قراءة النتائج في غضون 30 دقيقة من إضافة محلول الإيقاف.
اتصل شخص: Mr. Steven
الهاتف :: +8618600464506