Elisa LH Test Strip ISO13485 طقم اختبار هرمون اللوتين 96 قطعة

LH Elisa Kit هرمون ملوتن

1. الاستخدام المقصود

المقايسة المناعية للتحديد الكمي في المختبر للهرمون اللوتيني في مصل الإنسان.

2. ملخص

• LH (الهرمون الملوتن) ، جنبًا إلى جنب مع FSH (الهرمون المنبه للجريب) ، ينتمي إلى عائلة gonadotropin.ينظم LH و FSH النمو ويحفزهما ووظيفة الغدد التناسلية (المبايض والخصيتين) بشكل تآزري.مثل FSH و TSH و hCG ، LH هو بروتين سكري يتكون من وحدتين فرعيتين (سلاسل α- و β).(1، 2، 3) هذا الهرمون البروتيني ، الذي يتكون من 121 حمض أميني وثلاث سلاسل سكر ، له وزن جزيئي قدره 29500 دالتون.في النساء ، تعمل الغدد التناسلية داخل دائرة تنظيم ما تحت المهاد والغدة النخامية والمبيض للتحكم في الدورة الشهرية.
• يتم إطلاق LH و FSH في نبضات من الخلايا الموجهة للغدد التناسلية في الغدة النخامية الأمامية وتمر عبر مجرى الدم إلى المبايض.هنا تحفز الجونادوتروبين نمو ونضج الجريب وبالتالي التخليق الحيوي لهرمون الاستروجين والبروجسترون.تحدث أعلى تركيزات LH خلال ذروة منتصف الدورة وتحفز الإباضة وتكوين الجسم الأصفر ، وهو منتج إفراز رئيسي هو البروجسترون.في خلايا Leydig في الخصيتين ، يحفز LH إنتاج هرمون التستوستيرون.يستخدم تحديد تركيز الهرمون اللوتيني في توضيح الاختلالات داخل نظام ما تحت المهاد والغدة النخامية والغدد التناسلية.تحديد LH بالتزامن يستخدم مع FSH للإشارات التالية: الأمراض الخلقية مع انحرافات الكروموسومات (مثل متلازمة تيرنر) ، تكيس المبايض (PCO) ، توضيح أسباب انقطاع الطمث ، متلازمة انقطاع الطمث ، والاشتباه في قصور خلايا Leydig.(1 ، 4 ، 5)

3. مبدأ الاختبار

مبدأ ساندويتش.المدة الإجمالية للمقايسة: 80 دقيقة.

• يتم الجمع بين عينة ميكروويلات مغلفة بمضاد LH والإنزيم المسمى Anti-LH.

• أثناء الحضانة ، يُسمح للهرمون اللوتيني الموجود في العينة بالتفاعل

في وقت واحد مع اثنين من الأجسام المضادة ، مما أدى إلى وجود جزيئات LH

محصور بين المرحلة الصلبة والأجسام المضادة المرتبطة بالإنزيم.

• بعد الغسل ، يتم تكوين معقد بين الطور الصلب ، و LH داخل العينة والأجسام المضادة المرتبطة بالإنزيم عن طريق التفاعلات المناعية.

• ثم يتم إضافة محلول الركيزة وتحفيزه بواسطة هذا المركب ، مما يؤدي إلى تفاعل كروموجيني.يتم قياس التفاعل اللوني الناتج على أنه امتصاص.

• يتناسب الامتصاص مع كمية LH في العينة.

الكواشف

المواد المقدمة

• صفيحة ميكروسكوبية مغلفة ، 8 × 12 شرائط ، 96 بئراً ، مغلفة مسبقًا بفأرة أحادية النسيلة

مكافحة LH.

• أجهزة معايرة ، 6 قوارير ، 1 مل لكل منها ، جاهزة للاستخدام ؛التركيزات: 0 (A) ، 5 (B) ، 20 (C) ، 50 (D) ، 100 (E) و 200 (F) mIU / mL.

• Enzyme Conjugate ، 1 قارورة ، 11 مل من HRP (الفجل البيروكسيديز) المسمى الماوس أحادي النسيلة Anti-LH في المخزن المؤقت Tris-NaCl الذي يحتوي على BSA (الزلال المصل البقري).يحتوي على 0.1٪ مادة حافظة ProClin300.

• مادة سفلية ، قارورة واحدة ، 11 مل ، جاهزة للاستخدام ، (رباعي ميثيل بنزيدين) TMB.

• محلول إيقاف ، قارورة واحدة ، 6.0 مل من 1 مول / لتر حامض الكبريتيك.

• محلول غسيل مركّز ، قارورة واحدة ، 25 مل (40X مركّز) ، PBS-Tween

يغسل الحل.

• IFU ، 1 نسخة.

• غطاء الطبق: قطعة واحدة.

المواد المطلوبة (لكن لم يتم توفيرها)

• قارئ صفيحة ميكروسكوبية بقدرة امتصاص بطول موجي 450 نانومتر و 620 نانومتر.

• غسالة ميكروسكوبية.

• حاضنة

4. إجراء الاختبار

• استخدم فقط عدد الآبار المطلوبة وقم بتنسيق آبار الألواح الدقيقة من أجلها

كل معاير وعينة ليتم معايرتها.

• أضف 25 ميكرولتر من أجهزة المعايرة أو العينات لكل بئر.

• أضف 100 ميكرولتر من الإنزيم المتقارن إلى كل بئر.

• رجّ الصفيحة المصغرة برفق لمدة 30 ثانية حتى تمتزج.

• قم بتغطية الطبق بغطاء لوحة واحتضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة.

• تخلص من محتويات الصفيحة الدقيقة عن طريق الصب أو الشفط.إذا

صب ، انقر فوق اللوح وجففه بورق ماص.

• أضف 350 ميكرولتر من محلول الغسيل ، وصب (الصنبور وصمة عار) أو نضح.كرر 4 مرات إضافية ليصبح المجموع 5 غسلات.يمكن استخدام غسالة شريطية أوتوماتيكية.في نهاية الغسيل ، اقلب اللوحة واضغط على أي محلول غسيل متبقي على ورق ماص.

• أضف 100 ميكرولتر من الركيزة إلى كل بئر.

• احضنيها في درجة حرارة محيطة (18-25 ℃) في الظلام للتفاعل لمدة 20 دقيقة.لا تهز اللوحة بعد إضافة فرعية.

• أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف لكل بئر.

• رجّ لمدة 15-20 ثانية لخلط السائل داخل الآبار.من المهم أن

تأكد من أن اللون الأزرق يتغير إلى اللون الأصفر تمامًا.

• اقرأ امتصاص كل بئر عند 450 نانومتر (باستخدام 620 إلى 630 نانومتر مثل

الطول الموجي المرجعي لتقليل عيوب البئر) في قارئ الألواح الدقيقة.