مجموعة اختبار إليسا البلازما IgM 96 قطعة طقم اختبار تشخيص الأجسام المضادة HAV

طقم اختبار HAV IgM Elisa Kit 96

رقم Catolog: BE301A

1. المبدأ

1. تستخدم هذه المجموعة طريقة الالتقاط ELISA للكشف عن مضاد HAV IgM.يتم طلاء الجسم المضاد IgM (μchain) المنقى للفأر على المرحلة الصلبة من الآبار المتعددة.
2. يضاف HAV-Ag متقارن إلى الآبار المطلية بعد إضافة العينة المخففة وحضنها.ثم يضاف بيروكسيداز الفجل المسمى HAV-Ag.إذا كان HAV-IgM موجودًا في العينة ، فسيتم تكوين مركب من Anti-μ-chain-HAV-IgM -HAV-Ag- المسمى بـ HRP.
3. اغسل الآبار لإزالة مكونات المصل الأخرى غير المحدودة ، واحتضانها مع الركيزة (TMB) لتشكيل منتج ملون ، وقياس الامتصاصية عند 450 نانومتر للإشارة إلى وجود أو عدم وجود HAV-IgM في العينة.
4. الاختبار خاص وحساس وقابل للتكرار وسهل التشغيل.

2. المواد المقدمة

1. بلوك Microwell ذو اللوحة 1 المطلية بسلسلة مضادة لـ μ (96 ويلزًا)
2. إنزيم Conjugant (HAVAg-HRP) زجاجة واحدة (6 مللي)
3. زجاجة HAV-Ag 1 مقترنة (6 مل)
4. مصل التحكم السلبي 1 قارورة (1 مل)
5. مصل التحكم الإيجابي 1 قارورة (1 مل)
6. 20 X Wash Buffer (التخفيف قبل الاستخدام) 1 زجاجة (30 مللي)
7. الركيزة 1 زجاجة (6 مل)
8. زجاجة B 1 الركيزة (6ml)
9. وقف الحل (2 م H2SO4) 1 زجاجة (6 مل)
10. كيس بلاستيكي 1 كيس
11. ختم ورقة 3 قطع
12. دليل 1 لكل منهما

3. إجراء الاختبار

1. أحضر مجموعة ELISA للأجسام المضادة IgM لفيروس التهاب الكبد A (جميع الكواشف) ، وعينات إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام (حوالي 30 دقيقة).

2. تمييع المخزن المؤقت للغسيل المركز 1:19 مع ddH2O.

3. تمييع العينة (1: 1000) بمحلول ملحي فسيولوجي.

4. لكل اختبار ، قم بتعيين عنصر تحكم فارغ ، واثنين من موجبين وثلاثة عناصر تحكم سلبية.أضف 100 مايكرولتر من مصل التحكم الإيجابي والسلبي إلى آبار التحكم الإيجابية والسلبية على التوالي.

5. أضف 100 مايكرولتر من العينة المخففة إلى آبار الاختبار الأخرى.

6. غطي الآبار بورق مانع للتسرب ، ثم احضنها لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية.

7. تخلص من السائل في جميع الآبار واملأ الآبار بمحلول الغسيل.توضع جانباً لمدة 15 ثانية ، وتخلص من السائل في جميع الآبار واملأ الآبار بمحلول الغسيل.كرر 5 مرات وجفف الآبار بعد آخر غسلة.

8. أضف 50 ميكرولتر متقارن HAV-Ag في كل بئر باستثناء الفراغ.

9. أضف 50 ميكرولتر إنزيم متقارن في كل بئر ما عدا الفراغ

10- غطي الآبار بورق مانع للتسرب ، ثم احضنها لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية.

11. كرر الخطوة 7.

12. إضافة 50 ميكرولتر الركيزة A و B على التوالي لكل بئر ، وتخلط بلطف محمية من الضوء واحتضان 15 دقيقة عند 37 درجة مئوية.

13. أضف 50 مايكرولتر من محلول التوقف في كل بئر لإيقاف التفاعل ، بما في ذلك البئر الفارغة.

14. قم بقياس الامتصاصية عند 450 نانومتر مقابل الفراغ ، أو قم بقياس الامتصاصية عند 450 نانومتر / 630-690 نانومتر.