Thyrotropin TSH ELISA TEST اختبار هرمون تحفيز الغدة الدرقية

حار بيع TSH ELISA TEST KIT
المرجع: اختبارات DS177701 96

الاستخدام المقصود
المقايسة المناعية للتحديد الكمي في المختبر للثيروتروبين في مصل الإنسان.

1. ملخص

• هرمون الغدة الدرقية (TSH ، ثيروتروبين) هو بروتين سكري له وزن جزيئي تقريبًا.30000 دالتون وتتكون من وحدتين فرعيتين.
• يعتبر قياس تركيز المصل في كثير من الأحيان ثيروتروبين (TSH) ، وهو بروتين سكري بوزن جزيئي يبلغ 28000 دالتون ويتم إفرازه من الغدة النخامية الأمامية ، بشكل عام المؤشر الأكثر حساسية المتاح لتشخيص قصور الغدة الدرقية الأولي والثانوي (الغدة النخامية) (1 ، 2).
• قياسات TSH مفيدة بنفس القدر في التمييز بين قصور الغدة الدرقية الثانوي والثالث (الوطائي) من مرض الغدة الدرقية الأساسي.يتم تنظيم إفراز هرمون TSH من الغدة النخامية بواسطة عامل إطلاق الثيروتروبين (TRH) ، والذي يفرزه الوطاء ، وعن طريق العمل المباشر لـ T4 و ثلاثي يودوثيرونين (T3) ، هرمونات الغدة الدرقية ، في الغدة النخامية.
• زيادة مستويات T3 و T4 يقلل من استجابة الغدة النخامية للتأثيرات التحفيزية لـ TRH.في قصور الغدة الدرقية الثانوي والثالث ، تكون تركيزات T4 منخفضة عادةً ومستويات TSH منخفضة أو طبيعية بشكل عام.يسبب هذا إما نقص الغدة النخامية TSH (قصور الغدة الدرقية الثانوي) أو قصور في تحفيز الغدة النخامية بواسطة TRH (قصور الغدة الدرقية الثالثي).
• يميز اختبار التحفيز TRH هذه الشروط.في حالة قصور الغدة الدرقية الثانوي ، يتم إضعاف استجابة TSH لـ TRH بينما يتم الحصول على استجابة طبيعية أو متأخرة في قصور الغدة الدرقية العالي. علاوة على ذلك ، فإن ظهور فحوصات قياس الإنزيم المناعي قد زود المختبر بحساسية كافية لتمكين التمييز بين فرط نشاط الغدة الدرقية من سكان الغدة الدرقية وتوسيع نطاق فائدة قياسات TSH.هذه الطريقة عبارة عن اختبار من الجيل الثاني ، يوفر وسيلة للتمييز في نطاق فرط نشاط الغدة الدرقية.(3)

2. الكواشف المواد المقدمة
• صفيحة ميكروسكوبية مغلفة ، 8 × 12 شريطًا ، 96 بئراً ، مغلفة مسبقًا بفأر وحيد النسيلة مضاد لـ TSH.
• أجهزة معايرة ، 6 قوارير ، 1 مل لكل منها ، جاهزة للاستخدام ؛التركيزات: 0 (A) ، 0.5 (B) ، 2 (C) ، 5 (D) ، 10 (E) و 25 (F) μIU / mL.
• إنزيم متقارن ، قارورة واحدة ، 6.0 مل من HRP (بيروكسيديز الفجل) المسمى مضاد TSH أحادي النسيلة للفأر في محلول Tris-NaCl الذي يحتوي على BSA (ألبومين مصل الأبقار).يحتوي على 0.1٪ مادة حافظة ProClin300.
• مادة سفلية ، قارورة واحدة ، 11 مل ، جاهزة للاستخدام ، (رباعي ميثيل بنزيدين) TMB.
• إيقاف المحلول ، قارورة واحدة ، 6.0 مل من 1 مول / لتر حامض الكبريتيك.
• محلول غسيل مركز ، قارورة واحدة ، 25 مل (40X مركز) ، محلول غسيل PBS-Tween.
• IFU ، 1 نسخة.
• غطاء الطبق: قطعة واحدة.

المواد المطلوبة (لكن لم يتم توفيرها)
• قارئ صفيحة ميكروسكوبية بقدرة امتصاص بطول موجي 450 نانومتر و 620 نانومتر.
• غسالة ميكروسكوبية.
• حاضنة.
• شاكر لوحة.
• الماصات الدقيقة والماصات الدقيقة متعددة القنوات توفر 50 ميكرولتر بدقة أفضل من 1.5٪.
• ورق ماص.
• ماء مقطرة

3. إجراء الاختبار

تأكد من أن عينات المرضى وأجهزة المعايرة وأدوات التحكم في درجة حرارة الغرفة (18-25 درجة مئوية) قبل القياس.تخلط جميع الكواشف من خلال قلبها بلطف قبل الاستخدام.

• استخدم فقط عدد الآبار المطلوبة وقم بتنسيق آبار الألواح الدقيقة لكل معايرة وعينة ليتم معايرتها.• أضف 25 ميكرولتر من أجهزة المعايرة أو العينات لكل بئر.

• أضف 100 ميكرولتر من الإنزيم المتقارن إلى كل بئر.

• رجّ الصفيحة المصغرة برفق لمدة 30 ثانية حتى تمتزج.

• قم بتغطية الطبق بغطاء الطبق واحتضنه بدرجة 37 لمدة 60 دقيقة.

• تخلص من محتويات الصفيحة الدقيقة عن طريق الصب أو الشفط.في حالة الصب ، اضغط على اللوح وجففه بورق ماص.

• أضف 350 ميكرولتر من محلول الغسيل والصب (الصنبور والصبغ) أو نضح.كرر 4 مرات إضافية ليصبح المجموع 5 غسلات.يمكن استخدام غسالة شريطية أوتوماتيكية.في نهاية الغسيل ، اقلب اللوحة واضغط على أي محلول غسيل متبقي على ورق ماص.

• أضف 100 ميكرولتر من الركيزة إلى كل بئر.

• يغطى ويحضن في درجة حرارة محيطة (18-25) في الظلام للتفاعل لمدة 20 دقيقة.لا تهز اللوحة بعد إضافة فرعية.

• أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف لكل بئر.

• رجّ لمدة 15-20 ثانية لخلط السائل داخل الآبار.من المهم التأكد من أن اللون الأزرق يتغير إلى اللون الأصفر تمامًا.

• اقرأ امتصاص كل بئر عند 450 نانومتر (باستخدام 620 إلى 630 نانومتر كطول موجي مرجعي لتقليل عيوب البئر) في قارئ لوحة ميكروية.يجب قراءة النتائج في غضون 30 دقيقة من إضافة محلول الإيقاف