ISO Thyroxine T4 Elisa Test Free T4 Serum Test 110 دقيقة وقت القراءة

T4 الثيروكسين
المرجع: اختبارات DS177703 96

1. الاستخدام المقصود
المقايسة المناعية للتحديد الكمي في المختبر من هرمون الغدة الدرقية في مصل الإنسان.

2. ملخص
هرمون الغدة الدرقية (T4) هو المنتج الرئيسي الذي تفرزه الغدة الدرقية وهو جزء لا يتجزأ من نظام تنظيم ما تحت المهاد والغدة النخامية والغدة الدرقية.لها وظيفة التأثير الابتنائي في عملية التمثيل الغذائي.يتكون الثيروكسين في تفاعل اقتران من جزيئين DIT (3،5-diiodotyrosine) في الغدة الدرقية.يتم تخزينه مرتبطًا بالثيروجلوبولين في لومينا بصيلات الغدة الدرقية ويتم إفرازه على النحو المطلوب تحت تأثير TSH.(1 ، 2) يوجد الجزء الأكبر (> 99٪) من إجمالي هرمون الغدة الدرقية (T4) في مصل الدم في شكل مرتبط بالبروتين.نظرًا لأن تركيزات بروتينات النقل في مصل الدم تخضع لتأثيرات خارجية وداخلية ، يجب أيضًا مراعاة حالة البروتينات الرابطة في تقييم تركيز هرمون الغدة الدرقية في مصل الدم.إذا تم تجاهل ذلك ، فإن التغييرات في البروتينات الملزمة (على سبيل المثال بسبب المستحضرات المحتوية على الإستروجين ، أثناء الحمل أو في وجود المتلازمة الكلوية وما إلى ذلك) يمكن أن تؤدي إلى تقييمات خاطئة لحالة التمثيل الغذائي للغدة الدرقية.(3 ، 4 ، 5 ، 6 ، 7) يمكن استخدام تحديد T4 للإشارات التالية: الكشف عن فرط نشاط الغدة الدرقية ، واكتشاف قصور الغدة الدرقية الأولي والثانوي ، ومراقبة العلاج بقمع TSH.(8)
يستخدم اختبار T4 مبدأ اختبار تنافسي مع جسم مضاد موجه خصيصًا ضد T4.T4 داخلي المنشأ ، تم إطلاقه بفعل 8-anilino-1-naphthalene sulfonic acid (ANS).

3. الكواشف المواد المقدمة
• صفيحة ميكروسكوبية مغلفة ، 8 × 12 شريط ، 96 بئر ، مغلفة مسبقًا بمشتق T4.
• أجهزة معايرة ، 6 قوارير ، 1 مل لكل منها ، جاهزة للاستخدام ؛التركيزات: 0 (A) ، 2.5 (B) ، 5 (C) ، 10 (D) ، 15 (E) و 30 (F) ميكروغرام / ديسيلتر.
• إنزيم متقارن ، قارورة واحدة ، 6.0 مل من HRP (بيروكسيداز الفجل) المسمى الفأر أحادي النسيلة T4 في محلول Tris-NaCl الذي يحتوي على BSA (ألبومين مصل البقر).يحتوي على 0.2٪ مادة حافظة ProClin300.ANS 1.5 مجم / مل.
• مادة سفلية ، قارورة واحدة ، 11 مل ، جاهزة للاستخدام ، (رباعي ميثيل بنزيدين) TMB.
• إيقاف المحلول ، قارورة واحدة ، 6.0 مل من 1 مول / لتر حامض الكبريتيك.
• محلول غسيل مركز ، قارورة واحدة ، 25 مل (40X مركز) ، محلول غسيل PBS-Tween.
• IFU ، 1 نسخة.
• غطاء الطبق: قطعة واحدة.

4. المواد المطلوبة (لكن لم يتم توفيرها)
• قارئ صفيحة ميكروسكوبية بقدرة امتصاص بطول موجي 450 نانومتر و 620 نانومتر.
• غسالة ميكروسكوبية.
• حاضنة.
• شاكر لوحة.
• الماصات الدقيقة والماصات الدقيقة متعددة القنوات توفر 50 ميكرولتر بدقة أفضل من 1.5٪.
• ورق ماص.
• ماء مقطرة

إجراء الاختبار

تأكد من أن عينات المرضى وأجهزة المعايرة وأدوات التحكم في درجة حرارة الغرفة (18-25 درجة مئوية) قبل القياس.تخلط جميع الكواشف من خلال قلبها بلطف قبل الاستخدام.

• استخدم فقط عدد الآبار المطلوبة وقم بتنسيق آبار الألواح الدقيقة لكل معايرة وعينة ليتم معايرتها.• أضف 50 ميكرولتر من أجهزة المعايرة أو العينات لكل بئر.

• أضف 50 ميكرولتر من الإنزيم المتقارن إلى كل بئر.

• رجّ الصفيحة المصغرة برفق لمدة 30 ثانية حتى تمتزج.

• قم بتغطية الطبق بغطاء الطبق واحتضنه بدرجة 37 لمدة 60 دقيقة.

• تخلص من محتويات الصفيحة الدقيقة عن طريق الصب أو الشفط.في حالة الصب ، اضغط على اللوح وجففه بورق ماص.

• أضف 350 ميكرولتر من محلول الغسيل ، وصب (صنبور وصمة) أو نضح.كرر 4 مرات إضافية ليصبح المجموع 5 غسلات.يمكن استخدام غسالة شريطية أوتوماتيكية.في نهاية الغسيل ، اقلب اللوحة واضغط على أي محلول غسيل متبقي على ورق ماص.

• أضف 100 ميكرولتر من الركيزة إلى كل بئر.

• يغطى ويحضن في درجة حرارة محيطة (18-25) في الظلام للتفاعل لمدة 20 دقيقة.لا تهز اللوحة بعد إضافة فرعية.• أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف لكل بئر.

• رجّ لمدة 15-20 ثانية لخلط السائل داخل الآبار.من المهم التأكد من أن اللون الأزرق يتغير إلى اللون الأصفر تمامًا.

• اقرأ امتصاص كل بئر عند 450 نانومتر (باستخدام 620 إلى 630 نانومتر كطول موجي مرجعي لتقليل عيوب البئر) في قارئ لوحة ميكروية.يجب قراءة النتائج في غضون 30 دقيقة من إضافة محلول الإيقاف