BIOVANTION Anti Thyroglobulin Antibody Test Anti Tg Ab Test Kit

مجموعة اختبار مضاد Tg ELISA Thyroglobulin Ab

1. الاستخدام المقصود

المقايسة المناعية للتحديد الكمي في المختبر للأجسام المضادة للثيروجلوبولين في مصل الدم البشري.يستخدم تحديد مضاد ‐ Tg كعامل مساعد في الكشف عن أمراض الغدة الدرقية المناعية الذاتية.

2. ملخص

يتم إنتاج Thyroglobulin (Tg) في الغدة الدرقية وهو مكون رئيسي في تجويف جريب الغدة الدرقية.بالتآزر مع البيروكسيديز النوعي لإنزيم الغدة الدرقية (TPO) ، يلعب Tg وظيفة أساسية في إضافة اليود إلى L-tyrosine وفي تكوين هرمونات الغدة الدرقية T4 و T3.كل من Tg و TPO يحتمل أن تكون ذاتي المنشأ.

تم العثور على تركيزات مصل مرتفعة من الأجسام المضادة ضد Tg (Tg ‐ الأجسام المضادة الذاتية) في الأشخاص الذين يعانون من التهاب الغدة الدرقية القائم على المناعة الذاتية.تشير التركيزات العالية من مضادات ‐ Tg مع مضادات TPO إلى التهاب الغدة الدرقية الارتشاحي اللمفاوي المزمن (مرض هاشيموتو).يبلغ تواتر الأجسام المضادة للثيروجلوبولين حوالي 70-80٪ في الأشخاص المصابين بالتهاب الغدة الدرقية المناعي الذاتي ، بما في ذلك مرض هاشيموتو ، وحوالي 30٪ في الأفراد المصابين بمرض جريفز. يعتبر اختبار مضاد ‐ Tg مهمًا للاستخدام في مراقبة مسار التهاب الغدة الدرقية هاشيموتو و للتشخيص التفريقي (حالات التهاب الغدة الدرقية المناعي الذاتي المشتبه به مجهولة المصدر مع نتائج سلبية لاختبار مضاد TPO ، ومرض جريفز دون تسلل الخلايا الليمفاوية ، واستبعاد التداخل بواسطة الأجسام المضادة الذاتية Tg ‐ في اختبار Tg).

على الرغم من أن حساسية الإجراء يمكن أن تزداد عن طريق التحديد المتزامن للأجسام المضادة للغدة الدرقية (الأجسام المضادة TPO ، TSH مستقبلات ‐) ، فإن النتيجة السلبية لا تستبعد بشكل قاطع وجود مرض مناعي ذاتي.لا يرتبط مستوى عيار الجسم المضاد بالنشاط السريري للمرض.يمكن أن يصبح التتر المرتفع في البداية سالبًا إذا استمر المرض لفترة أطول من الوقت أو إذا

مغفرة يحدث.إذا ظهرت الأجسام المضادة مرة أخرى بعد الهدوء ، فمن المحتمل حدوث انتكاس.

تستخدم مقايسات الممتز المناعي المرتبطة بالإنزيم مستضدًا بشريًا وأجسامًا مضادة IgG مضادة للإنسان (مضادات IgG).

3.Reagents المواد المقدمة

• صفيحة ميكروسكوبية مطلية ، 8 × 12 شريحة ، 96 بئر.مغلفة مسبقًا بمستضد TG البشري.

• معايرة ، 6 قوارير ، 1 مل لكل منها ، جاهزة للاستخدام ؛التركيزات: 0 (A) ، 50 (B) ، 150 (C) ، 500 (D) ، 1000 (E) و 2000 (F) IU / mL.

• إنزيم متقارن ، قارورة واحدة ، 11.0 مل من HRP (بيروكسيديز الفجل) المسمى بالأجسام المضادة IgG المضادة للإنسان في الأرانب (مضاد IgG) في المخزن المؤقت Tris-NaCl الذي يحتوي على BSA (ألبومين المصل البقري).يحتوي على 0.1٪ مادة حافظة ProClin300.

• Serum Diluent: 1 قارورة ، 11 مل.تحتوي على أملاح عازلة وصبغة

• محلول غسيل مركّز ، قارورة واحدة ، 25 مل (40X مركّز) ، محلول غسيل PBS-Tween.

• مادة سفلية ، قارورة واحدة ، 11 مل ، جاهزة للاستخدام ، (رباعي ميثيل بنزيدين) TMB.

• محلول إيقاف ، قارورة واحدة ، 6.0 مل من 1 مول / لتر حامض الكبريتيك.

• IFU ، 1 نسخة.

• غطاء الطبق: 2 قطعة.

4. المواد المطلوبة (لكن لم يتم توفيرها)

• قارئ صفيحة ميكروية بقدرة امتصاص بطول موجي يبلغ 450 نانومتر و 620 نانومتر.
• غسالة ميكروسكوبية.
• حاضنة.
• شاكر لوحة.
• الماصات الدقيقة والماصات الدقيقة متعددة القنوات توفر 50 ميكرولتر بدقة أفضل من 1.5٪.
• ورق ماص.
• ماء مقطرة

5. إجراء الاختبار

• استخدم فقط عدد الآبار المطلوبة وقم بتنسيق آبار الصفيحة الدقيقة لكل معاير وعينة ليتم معايرتها.

• أضف 100 ميكرولتر من أجهزة المعايرة إلى كل بئر.

• أضف 100 ميكرولتر من عينة المخفف (اللون الأخضر) لكل بئر باستثناء آبار المعاير.

• أضف 10 ميكرولتر من العينة إلى كل عينة بئر مخفف (ملاحظة: ستتحول الكواشف الموجودة في الآبار إلى اللون الأزرق من الأخضر) ، ثم رجها لمدة 30 ثانية.

• تغطية اللوحة بغطاء لوحة واحتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

• تجاهل محتويات الصفيحة الدقيقة عن طريق الصب أو الشفط.في حالة الصب ، اضغط على اللوح وجففه بورق ماص.

• أضف 350 ميكرولتر من محلول الغسيل ، وصب (الصنبور والصق) أو نضح.كرر 4 مرات إضافية ليصبح المجموع 5 غسلات.في نهاية الغسيل ، اقلب اللوحة واضغط على أي محلول غسيل متبقي على ورق ماص.

• أضف 100 ميكرولتر من الإنزيم المتقارن ،

• تغطية اللوحة بغطاء لوحة واحتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة

• أضف 350 ميكرولتر من محلول الغسيل ، وصب (الصنبور والصق) أو نضح.كرر 4 مرات إضافية ليصبح المجموع 5 غسلات.في نهاية الغسيل ، اقلب اللوحة واضغط على أي محلول غسيل متبقي على ورق ماص.

• أضف 100 ميكرولتر من الركيزة إلى كل بئر.يغطى ويحضن في درجة حرارة محيطة (18-25 ℃) في الظلام للتفاعل لمدة 10 دقائق.لا تهز اللوحة بعد إضافة فرعية.

• أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف لكل بئر.

• يُرج لمدة 15-20 ثانية لخلط السائل داخل الآبار.من المهم التأكد من أن اللون الأزرق يتغير إلى اللون الأصفر تمامًا.

• اقرأ امتصاص كل بئر عند 450 نانومتر (باستخدام 620 إلى 630 نانومتر كطول موجي مرجعي لتقليل عيوب البئر) في قارئ لوحة ميكروية.يجب قراءة النتائج في غضون 30 دقيقة من إضافة محلول الإيقاف.