اختبار إليسا لـ HAV IgM
الاستخدام المقصود
مجموعة ELISA للجسم المضاد IgM لتهاب الكبد A الفيروس هو إنزيم في المختبر
معالجة المناعة للكشف عن HAV- IgM في مصل البشر أو البلازما.
المبدأ
تستخدم هذه المجموعة طريقة ELISA للكشف عن IgM ضد HAV.
تمت تغطية الأجسام المضادة لـ IgM ضد الإنسان في الفأر على المرحلة الصلبة
من العديد من الآبار. يتم إضافة HAV-Ag المرتبطة إلى الآبار المطلية بعد
تمت إضافة عينة مخففة واستحضانها.
إذا كان HAV-IgM موجود في العينة،
سوف يتشكل مجمع من مضادات السلسلة الميكرو-HAV-IgM HHAV-Ag -مسمّى بـ HRP.
غسل الآبار لإزالة مكونات مصل غير محدودة أخرى، والحضانة
مع الركيزة (TMB) لتشكيل منتج ملون، وقياس
مُستشعَر عند 450nm للإشارة إلى وجود أو غياب HAV-IgM
في العينة. الاختبار خاص، حساس، قابلة للتكرار وسهلة
-أجري العملية.
| تفاصيل المنتج |
الوصف |
| التسليم |
خلال 48 ساعة |
| مواصفات التعبئة |
8 × 12 شريط، 96 بئر |
| بلد المنشأ |
الصين |
| المصنع |
18 شهراً |
| طريقة الحفاظ |
2°C-8°C |
| العينة |
دم كامل |
| التشنج |
الفئة 1 |
| النوع |
مجموعة اختبار HAV IgM Elisa |
جمع العينات والحفاظ عليها
عينات مصل الدم يتم إعدادها بشكل روتيني من الوريد.
يتم إعداد العينات بشكل روتيني بكمية روتينية من مضاد التخثر
يمكن تخزين العينة عند 4 درجة مئوية إذا تم اختبارها
في غضون خمسة أيام. يمكن تخزين العينة عند -20 درجة مئوية لمدة 3 أشهر على الأقل.
تجنب التجفيف الدموي والتجمد المتكرر وذوبان العينات.
يجب أن يتم طردها من المركز أو تصفيتها قبل الاختبار.
ومنع المصل من التلوث البكتيري أثناء التجميع
التخزين
إجراء الاختبار
1.احضر مجموعة ELISA لمضادات IgM لفيروس التهاب الكبد A (جميع المفاعلات)
والعينات إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام (حوالي 30
الدقائق).
2خفيف عازل الغسيل المركز 1:19 مع ddH
3تدمير العينة (1:1000) بمحلول ملح فيزيولوجي.
4لكل اختبار، حدد ضابط واحد فارغ، واثنين إيجابي وثلاثة سلبية.
إضافة 100μl من مصل المراقبة الإيجابية والسلبية إلى المراقبة الإيجابية
آبار التحكم السلبية على التوالي.
5إضافة عينة 100μl مخففة إلى آبار الاختبار الأخرى.
6غطّي الآبار بأوراق الختم، ثم احبّس لمدة 30 دقيقة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية.
7. تخلص من السائل في جميع الآبار وملء الآبار مع محلول الغسيل. وضع
إلى جانب لمدة 15 ثانية ، رمي السائل في جميع الآبار وملء الآبار
مع محلول الغسيل كرر 5 مرات وجفف البئر بعد غسل آخر.
8إضافة 50 ميكرو لتر من HAV-Ag المرتبط في كل بئر باستثناء البيضاء.
9إضافة 50 ميكرو لتر من المرفق الإنزيمي في كل بئر باستثناء البيضاء
10تغطية الآبار بأوراق الختم، ثم الحضانة لمدة 30 دقيقة في 37 درجة مئوية.
11كرر الخطوة 7
12إضافة 50 μl من الركيزة A و B على التوالي إلى كل بئر، خلط بعناية
محمية من الضوء وتحويلها لمدة 15 دقيقة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية.
13إضافة 50μl من محلول التوقف في كل بئر لوقف التفاعل،
بما في ذلك البئر الفارغ.
14قياس امتصاص في 450 نانومتر ضد الفراغ، أو قياس
امتصاص في 450 نانومتر/630-690 نانومتر
