مجموعة اختبار الفيتامين D 25-OH ELISA

الاستخدام المقصود

مجموعة الكشف عن فيتامين D 25-OH (اختبار الإمتصاص المناعي المرتبط بالأنزيم ، ELISA). يستخدم في الاختبارات الكمية لفيتامين D في مصل الإنسان.

ملخص و أهمية سريرية

 فيتامين (د) هو مقدم هرمون قابل للذوبان في الدهون يتم إنتاجه بشكل أساسي من خلال التعرض للبشرة لأشعة الشمس. فيتامين (د) غير فعال بيولوجيا ويجب أن يخضع لخطوة هيدروكسيلاسيون لتصبح نشطة.أجسامنا لا تستطيع أن تخلق سوى فيتامين (د 3)يمكن تناول فيتامين د2 من خلال الأطعمة المخصبة أو المكملات الغذائية.فيتامينات D3 و D2 تلتصق بالبروتين المرتبط بفيتامين D (VDBP) في البلازما وتنتقل إلى الكبد لتصبح 25- هيدروكسي فيتامين D (25- OH فيتامين D)وبما أن فيتامين D 25-OH هو الشكل الرئيسي للتخزين ، يمكن استخدام تركيزه في الدم لتقييم الوضع العام لفيتامين D. أكثر من 95٪ من فيتامين D 25-OH القابل للقياس في المصل هو فيتامين D3 25-OH,في حين أن فيتامين D2 25-OH يصل إلى مستويات قابلة للقياس فقط في المرضى الذين يتناولون مكملات فيتامين D2. فيتامين D ضروري لصحة العظام. في الأطفال ، يمكن أن يؤدي نقص شديد إلى الإصابة بالصداع.في كبار السنوبالإضافة إلى ذلك، ترتبط تركيزات فيتامين D منخفضة من 25- OH مع انخفاض كثافة العظام.فقد ارتبطت نقص فيتامين (د) بالسكريويتم تحويل المكملات الغذائية للفيتامين D في الوقت الحالي في السوق (فيتامين D2 وفيتامين D3) إلى فيتامين D 25-OH في الكبد.يشار إلى مجموع تركيزات فيتامين D2 25-OH وفيتامين D3 25-OH في المصل أو البلازما على أنه "مجموع فيتامين D 25-OH"في الأوضاع السريرية، المراقبة الدقيقة لمستويات فيتامين د الكلية 25-OH أمر حاسم. Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicيستخدم اختبار فيتامين د الكلي أجسام مضادة محددة لالتقاط فيتامينات D3 و D2تم تصميم الاختبار لقياس الكمية الكلية للفيتامين D 25-OH في المصل البشري والبلازما للمساعدة في تقييم الفيتامينD الكفاية

المبدأ

تستند مجموعة اختبار فيتامين د الكمية 25-OH إلى اختبار الإمتصاص المناعي المرتبط بالأنزيم في المرحلة الصلبة.يستخدم نظام الاختبار أحد الأجسام المضادة لثبات المرحلة الصلبة (آبار ميكروتيتير) وجسم مضاد أحادي في المحلولالجهاز المضاد الثالث الذي يتعرف على الجهاز المضاد الثاني المتزامن مع إنزيم (بيروكسيداز الحشيش).يتم إضافة المعايير وعينة الاختبار (المصل) إلى آبار الميكروتيتر المغطاة بجسم مضاد فيتامين D 25-OHبعد غسل، يتم إضافة الجسم المضاد الثالث المسمّى بالبيروكسيداز الحشيشي (المرتبط). إذا كان فيتامين D البشري 25-OH موجودًا في العينة,سوف يجمع مع الأجسام المضادة في البئر والإنزيم المتقارب مما يؤدي إلى تشكيل شطائر بين المرحلة الصلبة والجسم المضاد المرتبط بالأنزيم. بعد الحضانة،يتم غسل الآبار بالماء لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطةيتم إضافة محلول من TMB وتحضير لمدة 20 دقيقة ، مما يؤدي إلى تطور لون أزرق. يتم إيقاف تطور اللون مع إضافة حل توقف.يتم تغيير اللون إلى اللون الأصفر ويتم قياسه بصورة طيفية عند 450 نانومترتركيزات فيتامين (د) متناسبة بشكل مباشر مع شدة اللون في عينة الاختبار.

الاستعدادات

1- يُسمح لجميع العينات والفاعلات بالوصول إلى درجة حرارة الغرفة (~ 25 درجة مئوية) ويتم خلطها جيداً عن طريق التحول الخفيف قبل الاستخدام.

2إعداد غسيل العازل عن طريق تخفيف غسيل التركيز 20 مرة بالماء غير الميولي. محلول الغسيل المخفف مستقر في درجة حرارة الغرفة لمدة أسبوع واحد على الأقل.

تحذير للمستخدمين

1يجب أن تستبعد التعامل مع أي أنابيب عن طريق الفم. استخدم فقط أنابيب ذات أطراف لمرة واحدة لكل عينة.

2لا تخلط المواد من مجموعات رئيسية مختلفة. لا تستخدم مكونات مجموعة بعد تاريخ انتهاء الصلاحية.

3.يجب وضع جميع المواد في درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام