للاستخدام التشخيصي والمهني في المختبر فقط.
اسم
مجموعة أدوات اختبار IgG ELISA لمضادات Ct (المصل/البلازما)
الاستخدام المقصود
هذه المجموعة عبارة عن كشف نوعي للمصل/البلازما البشرية لـ Chlamydia trachomatis (Ct) IgG. الطقم هو
مناسب للفحص السريري وتشخيص العدوى المقطعية في المصل/البلازما.
مبدأ الاختبار
يتم امتصاص المستضد Ct في الطور الصلب إلى صفيحة تفاعل البوليسترين. إذا كان هناك جسم مضاد Ct IgG
في عينة الاختبار، يرتبط بمستضد Ct المغلف في صفيحة ميكروية، ويشكل مركبًا من الأجسام المضادة للمستضد، وبعد ذلك
يرتبط بالإنزيم المسمى بالجسم المضاد ويشكل مركبًا من الأجسام المضادة للمستضد على السطح
من اللوحة الدقيقة، وعرض اللون الأزرق بشكل جيد من خلال عمل الركيزة. ولذلك، فإنه
يمكنه الكشف على وجه التحديد عن Ct IgG في المصل/البلازما البشرية.
إجراء الاختبار
1. قم بموازنة جميع الكواشف لدرجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة قبل الاستخدام.
2. قم بتخفيف محلول الغسيل بمعدل تخفيف 1:40 بالماء المقطر قبل الاستخدام.
3. أضف 100 ميكرولتر من مخفف العينة في البئر المقابل (لا تضف في البئر الفارغ، سلبيًا)
آبار التحكم وبئر التحكم الإيجابي.) يجب أن تكون العينة مطابقة لعدد الميكرو
لوحة، ينبغي تزويد كل لوحة مع التحكم السلبي 2 الآبار، والسيطرة الإيجابية 1 جيدا وفارغة
السيطرة على 1 جيدا. أضف عينة 5 ميكرولتر في البئر المقابل، واخلطها جيدًا باستخدام الماصة، ثم أضفها
50μL التحكم السلبي والتحكم الإيجابي لآبار التحكم السلبي والتحكم الإيجابي بشكل جيد (لا
أضف في الفراغ جيدا).
ملحوظة: استخدم طرف ماصة منفصل للتخلص من كل عينة، التحكم السلبي والإيجابي
تجنب التلوث المتبادل.
4. رجي الخليط بلطف حتى يمتزج لمدة 30 ثانية. احتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة مع غشاء لوحة الختم
ختم اللوحة.
5. في نهاية فترة الحضانة، قم بإزالة غطاء اللوحة والتخلص منه. أخرجه وأضف إليه عازلة الغسيل
كل بئر لمدة 20 ثانية. كرر 5 مرات. بعد دورة الغسيل النهائية، قم بقلب اللوحة على الجانب الآخر
ورق نشاف أو منشفة نظيفة، واضغط عليها لإزالة أي بقايا.
6. إضافة الإنزيم المترافق 50 ميكرولتر على التوالي (لا تضيفه في البئر الفارغة)
7. احتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة مع غشاء لوحة الختم ختم اللوحة. كرر
خطوة غسل لمدة 5 مرات كما في الخطوة 5.
8. أضف الركيزة أ 50 ميكرولتر والركيزة ب 50 ميكرولتر (لا تضيفها في البئر الفارغة). احتضان عند 37 درجة مئوية ل
10 دقائق مع غشاء لوحة الختم الذي يغلق اللوحة.
9. أضف 50 ميكرولتر من محلول التوقف إلى كل بئر (لا تضفه في البئر الفارغة). مزيج بلطف عن طريق الهز، وقراءة
الامتصاص خلال 10 دقائق بعد إيقاف التفاعل. معايرة قارئ اللوحة مع الفراغ
جيدًا واقرأ الامتصاصية عند 450 نانومتر. إذا تم استخدام أداة ترشيح مزدوجة، قم بتعيين المرجع
الطول الموجي 630 نانومتر. لا يُسمح بتعيين أي بئر فارغة في حالة استخدام الطول الموجي المزدوج للكشف. احسب
قيمة القطع وتقييم النتائج.
تفسير النتائج
قياس الوقت: اقرأ الكثافة الضوئية للعينة عند 450 نانومتر باستخدام قارئ الألواح الدقيقة.
متوسط قيمة OD للتحكم السلبي ≥ 0.1 ومتوسط قيمة OD للتحكم الإيجابي ≥ 0.8، الاختبار صالح،
وإلا فإن الاختبار غير صالح.
قيمة القطع (CO) = متوسط قيمة OD للتحكم السلبي × 3 (محسوبة بـ 0.10 عندما يكون المتوسط
قيمة OD للتحكم السلبي هي <0.10، ويتم حسابها بالقيمة الفعلية عندما يكون متوسط التحكم السلبي OD
القيمة > 0.10)
النتائج الإيجابية: قيمة OD للعينة ≥ CO
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
Arabic
