2يجب تخفيف عازل الغسيل بمعدل تخفيف 1:40 بالماء المقطر قبل الاستخدام.
3إضافة 100μL من مخفف العينة في البئر المقابلة (لا تضيف في البئر الفارغ،
(يجب أن تكون العينة مطابقة لعدد الميكرو
لوحة، كل لوحة يجب أن تكون مزودة مع التحكم السلبي 2 آبار، التحكم الإيجابي 1 جيدا والفراغ
تحكم 1 بعين. إضافة عينة 5μL في البئر المقابلة، خلط بعناية باستخدام البيبيت، إضافة
50μL التحكم السلبي والتحكم الإيجابي إلى آبار التحكم السلبي وآبار التحكم الإيجابي
إضافة في البئر الفارغ).
ملاحظة: استخدمي طرفيّة منفصلة لكل عينة، للضبط السلبيّ والإيجابيّ
تجنب التلوث المتقاطع
4هز بلطف للخلط لمدة 30 دقيقة، واكب في درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة مع غشاء لوحة الختم
أغلق اللوحة
5في نهاية فترة الحضانة، قم بإزالة غطاء الصحن وتخلص منه.
كل حفرة لمدة 20 ثانية. كرر 5 مرات. بعد الدورة الغسيل النهائية، وتحول لوحة على
ورقة غسيل أو منشفة نظيفة، واضغط عليها لإزالة أي بقايا.
6إضافة إنزيم كونجوجات 50μL (لا تضيف في البئر الفارغ)
7. تُحْرَقُ في 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة مع غشاء لوحة الختم الختم لوحة.
غسل الخطوة لمدة 5 مرات كما في الخطوة 5.
8إضافة الركيزة A 50μL والركيزة B 50μL (لا تضيف في البئر الفارغ).
10 دقائق مع غشاء لوحة الختم الختم لوحة.
9إضافة 50μL من محلول التوقف إلى كل بئر (لا تضيف في البئر الفارغ).
تم تعديل قارئ اللوحة مع جهاز القراءة الفارغ
حسنا وقراءة امتصاص في 450nm.
طول الموجة عند 630 نانومتر. لا يسمح بضبط أي بئر فارغ إذا استخدمت طول موجة مزدوج للكشف.
قيمة الحد وتقييم النتائج.
قياس الوقت: قراءة الكثافة البصرية للعينة عند 450 نانومتر مع قارئ لوحة ميكرو.
متوسط قيمة OD للسيطرة السلبية ≤ 0.1 ومتوسط قيمة OD للسيطرة الإيجابية ≥ 0.8، يكون الاختبار صالحاً،
وإلا فإن الاختبار غير صحيح.
قيمة قطع (CO) = متوسط قيمة OD للسيطرة السلبية x 3 (حسب بواسطة 0.10 عندما يكون متوسط
قيمة OD للسيطرة السلبية < 0.10، يتم احتسابها عن طريق القيمة الفعلية عندما يكون متوسط التحكم السلبي OD
القيمة > 0.10)
النتائج الإيجابية: قيمة OD للعينة ≥ CO
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
Arabic
