1.حساب عدد المطلوب من الأفقات الدقيقة. إزالة الأفقات الدقيقة المتبقية ووضعها مع المجفف في
أكياس بلاستيكية قابلة لإعادة الإغلاق، تغلق وتخزن عند درجة حرارة 2-8 درجة مئوية لاستخدامها لاحقاً.
2إضافة معايير وعينات:
21 البئر الفارغ: لا تضيف المفاعلات.
22 آبار المعايير: أضف 100 ميكرو لتر من المعايير إلى آبار التحكم المخصصة.
2.3 آبار الاختبار: إضافة 100 لتر من مخفف العينة إلى آبار الاختبار، ثم إضافة 10 لتر من العينة في البئر المقابلة.
2.4 هز الصفيحة برفق لمدة 20 ثانية، ثم غطي الصفيحة بمنغلق.
3الحضانة:حضانة الصفيحة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
4. غسل الخطوة (يمكن القيام به يدويا أو مع غسل الآلي):
غسل يدوي: إزالة خليط الحضانة بعناية عن طريق التخلص من المحلول في حاوية النفايات.
مع 350 ميكرو لتر من عازل الغسيل المخفف واهتز بهدوء لمدة 20-30 ثانية.
بعد الانتهاء من آخر خطوة غسل، اضغط على الصفحة على الورق الممتص لإزالة السائل المتبقي.
الغسل الآلي: يجب أن تكون غسالة الصحون الآلية معايرة لضمان غسل فعال. املأ كل بئر بـ 350 μL
خفيف الغسيل وغمس لمدة 20 إلى 30 ثانية استنشاق جميع الآبار تماماً كرر 4 مرات أخرى
5المرفق: أضف 100 ميكرو لتر من المرفق إلى كل بئر باستثناء البئر الفارغ.
6الحضانة: تغطية الآبار وتحضيرها عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
7غسل الخطوة: غسل الصحن 5 مرات كما هو موضح في الخطوة 4.
8الركيزة: أضف 50 ميكرو لتر من الركيزة أ و 50 ميكرو لتر من الركيزة ب في كل بئر، بما في ذلك البئر الفارغ.
الميكروفيل لمدة 20 ثانية، قم بحضانة في درجة حرارة 37 درجة مئوية في الظلام لمدة 15 دقيقة.
9- محلول التوقف: أضف 50 ميكرو لتر من محلول التوقف إلى كل بئر. يجب أن يتطور لون أصفر في الآبار التي تحتوي على عينات إيجابية.
10قراءة النتائج: قراءة عند 450/630-700 نانومتر خلال 30 دقيقة.
1ملاحظة: يمكن قراءة الصفائح الدقيقة أيضاً عند 450 نانومتر، ولكن يوصى بشدة بقراءتها عند 450/630-700 نانومتر
نتائج أفضل.
قياس الوقت: قراءة الكثافة البصرية للعينة عند 450 نانومتر مع قارئ لوحة ميكرو.
متوسط قيمة OD للسيطرة السلبية ≤ 0.1 ومتوسط قيمة OD للسيطرة الإيجابية ≥ 0.8، يكون الاختبار صالحاً،
وإلا فإن الاختبار غير صحيح.
قيمة قطع (CO) = متوسط قيمة OD للسيطرة السلبية x 3 (حسب بواسطة 0.10 عندما يكون متوسط
قيمة OD للسيطرة السلبية < 0.10، يتم احتسابها عن طريق القيمة الفعلية عندما يكون متوسط التحكم السلبي OD
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
Arabic
