مجموعة اختبار الإليزا IgG ل الكلاميديا تراخوماتيس (Ct)
للاستخدام التشخيصي المختبري والاستخدام المهني فقط.
الاسم
مجموعة اختبار الإليزا للأجسام المضادة لـ Ct IgG (مصل/بلازما)
الاستخدام المقصود
هذه المجموعة للكشف النوعي عن الأجسام المضادة لـ IgG ل الكلاميديا تراخوماتيس (Ct) في مصل/بلازما الإنسان. المجموعة
مناسبة للفحص السريري وتشخيص عدوى Ct في المصل/البلازما.
مبدأ الاختبار
يتم امتصاص مستضد Ct على الطور الصلب في طبق الميكرو الدقيق للتفاعل المصنوع من البوليسترين. إذا كان هناك جسم مضاد لـ Ct IgG
في عينة الاختبار، فإنه يرتبط بمستضد Ct المغلف في طبق الميكرو الدقيق، ويشكل مركب مستضد-جسم مضاد، ثم
يرتبط بالجسم المضاد المضاد الموسوم بالإنزيم ويشكل مركب مستضد-جسم مضاد-جسم مضاد على سطح
طبق الميكرو الدقيق، ويعرض لونًا أزرق في البئر المقابل عبر عمل الركيزة. لذلك، يمكنه الكشف بشكل خاص عن Ct IgG في مصل/بلازما الإنسان.
إجراء الاختبار
1. قم بمعادلة درجة حرارة جميع الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة قبل الاستخدام.
2. قم بتخفيف محلول الغسيل بنسبة تخفيف 1:40 بالماء المقطر قبل الاستخدام.
3. أضف 100 ميكرولتر من مخفف العينة في البئر المقابل (لا تضف في البئر الفارغ، وآبار التحكم السلبي، وبئر التحكم الإيجابي). يجب أن تتوافق العينة مع عدد أطباق الميكرو
الدقيقة، ويجب تزويد كل طبق بآبار تحكم سلبي 2، وبئر تحكم إيجابي 1، وبئر تحكم فارغ
1. أضف 5 ميكرولتر من العينة في البئر المقابل، واخلط جيدًا باستخدام الماصة، وأضف
50 ميكرولتر من التحكم السلبي والإيجابي إلى آبار التحكم السلبي وبئر التحكم الإيجابي (لا تضف في البئر الفارغ).
ملاحظة: استخدم طرف ماصة منفصل للتخلص منه لكل عينة، وتحكم سلبي وإيجابي لتجنب التلوث المتبادل.
4. رج بلطف للخلط لمدة 30 ثانية. احتضن عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة مع غشاء لوحة الختم
لختم اللوحة.
5. في نهاية فترة الحضانة، قم بإزالة غطاء اللوحة والتخلص منه. خذ، أضف محلول الغسيل إلى
كل بئر لمدة 20 ثانية. كرر 5 مرات. بعد دورة الغسيل النهائية، اقلب اللوحة على
ورق نشاف أو منشفة نظيفة، واضغط عليها لإزالة أي بقايا.
6. إضافة 50 ميكرولتر من الكونجوجيت الإنزيمي على التوالي (لا تضف في البئر الفارغ)
7. احتضن عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة مع غشاء لوحة الختم لختم اللوحة. كرر خطوة الغسيل 5 مرات كما في الخطوة 5.
8. أضف 50 ميكرولتر من الركيزة A و 50 ميكرولتر من الركيزة B (لا تضف في البئر الفارغ). احتضن عند 37 درجة مئوية لمدة
10 دقائق مع غشاء لوحة الختم لختم اللوحة.
9. أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف إلى كل بئر (لا تضف في البئر الفارغ). اخلط بلطف عن طريق الرج، واقرأ الامتصاص في غضون 10 دقائق بعد إيقاف التفاعل. قم بمعايرة قارئ اللوحة بالبئر الفارغ واقرأ الامتصاص عند 450 نانومتر. إذا تم استخدام جهاز ثنائي المرشحات، اضبط الطول الموجي المرجعي عند 630 نانومتر. لا يُسمح بوجود بئر فارغ إذا تم استخدام الطول الموجي المزدوج للكشف. احسب قيمة القطع وقيم النتائج.
تفسير النتائج
قياس زمني: اقرأ الكثافة الضوئية للعينة (OD) عند 450 نانومتر باستخدام قارئ لوحة الميكرو.
متوسط قيمة التحكم السلبي OD ≤ 0.1 ومتوسط قيمة التحكم الإيجابي OD ≥ 0.8، يكون الاختبار صالحًا،
وإلا فإن الاختبار غير صالح.
قيمة القطع (C.O.) = متوسط قيمة OD للتحكم السلبي × 3 (محسوبة بـ 0.10 عندما يكون متوسط
قيمة OD للتحكم السلبي
أقل من 0.10، محسوبة بالقيمة الفعلية عندما يكون متوسط قيمة OD للتحكم السلبي
أكبر من 0.10)
النتائج الإيجابية: قيمة OD للعينة ≥ C.O.